GV3101農桿菌
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
GV3101農桿菌 | 1 管 | 詢價 |
|
本GV3101菌株為C58型背景，核基因中含有篩選標簽—利福平抗性基因rif，為了便于轉化操作，此菌株攜帶一無自身轉運功能的胭脂堿型Ti質粒pMP90 (pTiC58DT-DNA)，此質粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件，pMP90 質粒自身的T-DNA轉移功能被破壞，但可以幫助轉入的雙元載體T-DNA順利轉移）。pMP90 型Ti 質粒含有篩選標簽：Strep和gent，賦予GV3101菌株鏈霉素和慶大霉素抗性，多用于擬南芥雙價載體的轉化。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
相關產品列表：
植物種屬鑒定PCR Mix 2（細胞核 ITS2）
植物種屬鑒定PCR Mix 3(質體 atpF-H)
植物種屬鑒定PCR Mix 4（質體 matK）
植物種屬鑒定PCR Mix 5（質體 psbK-I）
植物種屬鑒定PCR Mix 6（質體 rbcL）
植物種屬鑒定PCR Mix 7（質體 rpoB）
植物種屬鑒定PCR Mix 8（質體 rpoC1）
植物種屬鑒定PCR Mix 9（質體 trnH-psbA）
植物種屬鑒定PCR Mix 10（質體 trnL-F）
植物種屬鑒定PCR Mix 11（質體 trnL（P6））
轉ESPES基因植物PCR Mix （35S-EPSES 基因）
轉ESPES-Nos 基因植物PCR Mix （36S-EPSES-Nos 基因）
