【產品文獻支持】
影響因子(IF)=5.5：Pharmacological and Pharmacokinetic Studies with Agaricoglycerides, Extracted from Grifola frondosa,in Animal Models of Pain and Inflammation；山東大學《Inflammation》
【產品文獻支持】
影響因子(IF)=5.5：Antibacterial and Anti-inflammatory Activity of Traditional Chinese Herb Pairs, Angelica sinensis and Sophora flavescens；山東中醫藥大學《Inflammation》
l 大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）的含量。
l 有效期：6個月
l 保存條件：2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷
大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）ELISA試劑盒實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被小鼠孕激素受體（PGR）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成best終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠孕激素受體（PGR）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
樣本處理及要求
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。best后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4. 細胞培養物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會影響best后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
標本處理
1. 本公司只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。
2. 實驗前應預測標本含量，如果標本濃度過高，應對標本進行稀釋，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。
3. 若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預實驗驗證其有效性，并注意留存樣本。
4. 使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。
5. 若樣本為細胞培養上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細胞狀態、細胞數量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。
6. 某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。
7. 建議使用新鮮樣本，保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差。
需要而未提供的試劑和器材
1.酶標儀（450nm）
2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒溫箱
4.蒸餾水或去離子水
四、常見問題解答
小編簡單整理了5個問題，具體內容如下：
1、一個elisa試劑盒檢測幾個樣品？
小編自己在各大論壇看到best多的三個答案：
1）48T 可做42個樣本加6個標準曲線；96T 可做90個樣本加6個標準曲線
2）以96T試劑盒來算，定量的試劑盒一般可以做90個左右的樣品，定性的試劑盒可以做94個左右的樣品
3）96T的elisa試劑盒，去除標準品復孔檢測，還能檢測80個標本；48T的best多30個樣本。
2、elisa試劑盒96T的能做檢測多少血清樣品？板能重復利用嗎？
96T，一般做復孔的話，做標準曲線需要16個孔，剩下80個孔就可以做40個樣本。這個板不能重復利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。
3、想請教一下，我想用elisa法測血清里的一種抗原，查了資料，發現沒有現成的試劑盒用，現在就有2種備選方案，一種是買抗體對自己包被（查了R&D等大公司都沒有可用于elisa的單抗）。哪種比較好呢？自己包被的會不會比國產的試劑盒可靠呢？
如果你覺得技術不錯有隊其他公司不放心，可以自己購買抗體對自己包被，這個就是麻煩點，自己包被用著放心，舒心；
4、western 和ELISA 處理樣本有何差別？
Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制劑），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋白樣品。建議直接電泳，多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量，一次性用完一支，避免反復凍融。
ELISA樣品，直接腦組織冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣離心，大約220-250ul每支分裝（因為ELISA上樣量基本都是每孔100ul，做復孔，每個樣品2孔，就需要200ul，為了避免不夠2孔，分裝時要大于200ul每支），直接實驗。多余的-80保存，一樣避免反復凍融。
不過ELISA少量樣品進行預實驗，或者查閱文獻，看看大概組織里有多高濃度，選擇合適的試劑盒，測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準，或者濃度過低，小于試劑盒可測濃度。
