B16細胞小鼠黑色素瘤細胞 返回列表頁

B16細胞小鼠黑色素瘤細胞另：本公司代購美國ATCC,美國sciencell, 丹麥IBT，日本MBIC，Invitrogen, Millipore,德國細胞庫，ECACC,ICLC,DSMZ的細胞株以及菌株。齊一生物科技（上海）有限公司：.Web:www.qiyibio。。ｃｏｍ

B16細胞小鼠黑色素瘤細胞細胞培養方法 
1、收到細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快。
2、收到細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下 5-10ML培養基繼續培養：超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
4，將培養瓶置于37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。
5 、24小時后，細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，就可以傳代了。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
6，貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37度    5%CO2 培養
7.  收到細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清. 剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到15％去培養。若細胞迏到80%左右 ，血清濃度還是在10％。
培養基參考
500ml基礎培養基（含：必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素）、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素（P/S）溶液、FBS，適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養箱中使用
鼠傷寒沙門氏菌CMCC(B)50115
黑曲霉CMCC(B)98003
大腸埃氏菌8099
非01霍亂弧菌Vb0
傷寒沙門氏菌CMCC(B)50071
德氏乳桿菌保加利亞亞種CICC6045
乳鏈球菌CICC6016
瑞士乳桿菌CICC6024
巴氏醋桿菌巴氏亞種CICCT006
丙酮丁醇梭菌（丙酮丁醇桿菌）CICC8011
白球擬酵母CICC1040
粉狀畢赤酵母CICC1688
斯氏油脂酵母CICC1715
貝酵母CICC1408
綠色木霉=木素木霉CICC13015
康寧木霉CICC13012
紅曲霉CICC5036
平展米曲霉（米曲霉平展變種）CICC2345
亮白曲霉CICC2360
泡盛曲霉CICC2253
泡盛曲霉CICC2252
泡盛曲霉CICC2254
米曲霉CICC2066
黑曲霉CICC2377
米曲霉CICC2080
米曲霉CICC2412
米曲霉CICC2014
莫格球擬酵母CICC1709
魯氏接合酵母CICC1379
米曲霉CICC2412
米曲霉CICC2014
弗氏檸檬酸桿菌CICC20211
謝氏丙酸桿菌CICC10019
許旺酵母變種CCRC20332
大腸桿菌CCRC11447
DSMZ18235
巨大芽孢桿菌ACCC11107
球型芽孢桿菌ACCC11096
枯草芽孢桿菌ACCC10627
黃色短桿菌ACCC11063
產黃纖維單胞菌ACCC11055
保加利亞乳桿菌ACCC10638
干酷乳桿菌ACCC10639
植物乳桿菌ACCC11095
變形桿菌ACCC11002
惡臭假單胞菌ACCC10085
藤黃八疊球菌ACCC11001
乳酸鏈球菌ACCC10653
乳酸鏈球菌ACCC11092
乳酸鏈球菌ACCC11093
乳酸鏈球菌ACCC11094
蠟狀芽孢桿菌ACCC11077
熒光威克酵母ACCC20058
人毛乳頭細胞
人生發基質細胞
人毛囊外根鞘細胞
人毛囊內根鞘細胞
人毛囊角質細胞
淋巴細胞系統
人淋巴內皮細胞
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人扁桃體上皮細胞
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人胸腺成纖維細胞
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人食道微血管內皮細胞
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人肺微血管內皮細胞-成人
人肺動脈內皮細胞
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人支氣管上皮細胞
人氣管上皮細胞
人小氣道上皮細胞
人肺成纖維細胞
人肺成纖維細胞-成人
人支氣管平滑肌細胞
人氣管平滑肌細胞
人支氣管成纖維細胞
骨骼肌細胞系統
人骨骼肌細胞
人骨骼肌衛星細胞
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