PC-3細胞人前列腺癌細胞 返回列表頁

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PC-3細胞人前列腺癌細胞一、細胞操作參考書
二、生長特性：貼壁    懸浮
三、細胞生長條件：
培養基                  90%              （GIBCO）
血清              10%  FBS（GIBCO）
溫度                       37℃
空氣條件      5% CO2，,95% AIR
生長代數    P4
凍存條件    培養基70%、血清20%、DMSO10%
四、組成：
組份    規格
細胞一瓶    T25
細胞培養與操作說明    1份
五、細胞接收后的操作流程與注意事項
1.如果細胞為貼壁細胞，，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天；同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基，培養3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增殖而是繼續脫落死亡，請及時實驗室，技術人員會跟進解決
2.貼壁細胞生長緩慢：適當提高血清濃度（zui高不能超過20%），或可根據該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養瓶繼續培養
3.生長不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養基進行培養

六、細胞常規培養傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）
1．吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml  0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?-2min）
2．鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让福?~8ml *培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散
3．取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養
4．注意培養基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存
特別注意：（如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養，建議添加雙抗培養）
1.收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養基，如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基，請在原瓶培養基中額外添加10%的血清（原瓶培養基的繼續使用時間zui長不宜超過72小時）
2.貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞放置培養箱孵育過夜到第二天再做消化傳代
如簽收時出現培養瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并實驗室
2×Taq PCR MasterMix(含染料）    1ml
2×Taq PCR MasterMix(含染料）    5×1ml
2×Taq PCR MasterMix（不含染料）    1ml
2×Taq PCR MasterMix（不含染料）    5×1ml
2×Taq Plus PCR MasterMix(含染料）    0.5ml
2×Taq Plus PCR MasterMix(含染料）    5×1ml
2×Taq Plus PCR MasterMix（不含染料）    0.5ml
2×Taq Plus PCR MasterMix（不含染料）    5×1ml
2×Pfu PCR MasterMix(含染料）    0.5ml
2×Pfu PCR MasterMix(含染料）    5×1ml
2×Pfu PCR MasterMix（不含染料）    0.5ml
2×Pfu PCR MasterMix（不含染料）    5×1ml
2×Long Taq PCR Master Mix（含染料）    0.5ml
2×Long Taq PCR Master Mix（含染料）    5ml
2×Long Taq PCR Master Mix（不含染料）    0.5ml
2×Long Taq PCR Master Mix（不含染料）    5ml
2×HotStart Taq PCR MasterMix（含染料）    0.5ml
2×HotStart Taq PCR MasterMix（含染料）    5ml
2×HotStart Taq PCR MasterMix（不含染料）    0.5ml
2×HotStart Taq PCR MasterMix（不含染料）    5ml    
超純 dNTP Mixture(2.5 mM each)    1ml
超純 dNTP Mixture(2.5 mM each)    5×1ml
超純 dNTP Mixture(10 mM each)    1ml
超純 dNTP Mixture(10 mM each)    5×1ml
dATP 100mMsolution    0.25 ml
dCTP 100mM solution    0.25 ml
dGTP 100mM solution    0.25 ml
dTTP 100mM solution    0.25 ml
PCR enhancer    100μl
PCR enhancer    500μl
└ 肺大靜脈平滑肌細胞總DNA
└ 肺動脈成纖維細胞總DNA
└ 肺泡上皮細胞總DNA
└ 氣管上皮細胞總DNA
└ 支氣管上皮細胞總DNA
└ 小氣道上皮細胞總DNA
└ 肺成纖維細胞總DNA
└ 支氣管平滑肌細胞總DNA
└ 小氣道平滑肌細胞總DNA
└ 氣管平滑肌細胞總DNA
└ 支氣管成纖維細胞總DNA
循環系統
└ 心房肌細胞總DNA
└ 心室肌細胞總DNA
└ 心肌成纖維細胞總DNA
└ 心臟微血管內皮細胞總DNA
└ 主動脈內皮細胞總DNA
└ 主動脈平滑肌細胞總DNA
└ 臍靜脈內皮細胞總DNA
└ 臍動脈內皮細胞總DNA
└ 臍靜脈平滑肌細胞總DNA
└ 臍動脈平滑肌細胞總DNA
└ 大隱靜脈平滑肌細胞總DNA
└ 冠狀動脈內皮細胞總DNA
消化系統
└ 食管上皮細胞總DNA
└ 食管平滑肌細胞總DNA
└ 腸微血管內皮細胞總DNA
└ 腸動脈內皮細胞總DNA
└ 腸靜脈內皮細胞總DNA
└ 小腸平滑肌細胞總DNA
└ 結腸平滑肌細胞總DNA
└ 直結腸平滑肌細胞總DNA
└ 小腸粘膜上皮細胞總DNA
└ 結腸粘膜上皮細胞總DNA
└ 直腸粘膜上皮細胞總DNA
└ 肝內膽管上皮細胞總DNA
└ 肝實質細胞總DNA
└ 肝動脈內皮細胞總DNA
└ 肝動脈平滑肌細胞總DNA
└ 肝星形細胞總DNA
└ 肝竇內皮細胞總DNA
└ 胃粘膜上皮細胞總DNA
泌尿系統
└ 腎小球內皮細胞總DNA
└ 腎近曲管狀上皮細胞總DNA
└ 腎皮層上皮細胞總DNA
└ 腎上皮細胞總DNA
└ 輸尿管上皮細胞總DNA
└ 腎實質細胞總DNA
└ 腎系膜細胞總DNA
└ 膀胱上皮細胞總DNA
└ 膀胱平滑肌細胞總DNA
└ 腎動脈內皮細胞總DNA
└ 腎動脈平滑肌細胞總DNA
└ 腎成纖維細胞總DNA
└ 膀胱成纖維細胞總DNA
└ 尿道上皮細胞總DNA
生殖系統
└ 胎盤羊膜細胞總DNA
└ 胎盤滋養層細胞總DNA
└ 胎盤絨毛膜細胞總DNA
└ 子宮平滑肌細胞總DNA
└ 子宮成纖維細胞總DNA
└ 卵巢上皮細胞總DNA
└ 卵巢成纖維細胞總DNA
└ 卵巢微血管內皮細胞總DNA
└ 子宮內膜上皮細胞總DNA