人皮膚癌細胞系HS-4細胞 返回列表頁

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人皮膚癌細胞系HS-4細胞細胞培養方法 
1、收到細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快。
2、收到細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態時，請不要打開細胞培養瓶，應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養基吸出，留下 5-10ML培養基繼續培養：超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液，1000轉/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
4，將培養瓶置于37℃培養箱中培養，蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。
5 、24小時后，細胞形態已恢復并貼滿瓶壁，就可以傳代了。（貼壁細胞）將培養瓶里的培養基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘?？梢苑湃?7℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數量決定分瓶數，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
6，貼壁細胞 ，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液，37度    5%CO2 培養
7.  收到細胞后，請鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養基，使用進口胎牛血清. 剛接到細胞，若細胞不多時 血清濃度可以加到15％去培養。若細胞迏到80%左右 ，血清濃度還是在10％。
培養基參考
500ml基礎培養基（含：必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素）、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素（P/S）溶液、FBS，適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養箱中使用
    "Recombinant Cys-Protein G
"
    "Recombinant Protein A/G
"
    "Recombinant Streptavidin
"
重組鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子    "Recombinant Human Serum Albumin
"
重組鼠腫瘤壞死因子-α    
重組鼠成纖維細胞生長因子-堿性    
重組鼠IGF-I    
重組鼠表皮細胞生長因子    Endothelial Cell Growth Supplement
    Smooth Muscle Cell Growth Supplement
    Smooth Muscle Cell Growth Supplement
    Pericyte Growth Supplement
重組牛堿性成纖維細胞生長因子    Meningeal Cell Growth Supplement
    Neural Precursor Cell Growth Supplement
    Neuronal Growth Supplement
    Neural Precursor Cell Differentiation Supplement
重組蛋白A    Oligodendrocyte Precursor Cell Growth Supplement
重組蛋白G    Oligodendrocyte Growth Supplement
重組半胱氨酸-蛋白G    Oligodendrocyte Precursor Cell Differentiation Supplement
重組蛋白A/G    Schwann Cell Growth Supplement
重組鏈霉親和素    Astrocyte Growth Supplement
重組人血清白蛋白    Astrocyte Growth Supplement-Animal
    Microglia Growth Supplement
    Macrophage Growth Supplement
    Keratinocyte Growth Supplement
內皮細胞生長因子     BPE-free Keratinocyte Growth Supplement
平滑肌細胞生長因子    Keratinocyte Growth Supplement-animal component free
平滑肌細胞生長因子（不含血清）    Melanocyte Growth Supplement
周細胞生長因子    TPA-free Melanocyte Growth Supplement
 腦膜細胞生長因子    Fibroblast Growth Supplement
神經前體細胞生長因子    Fibroblast Growth Supplement-sf
 神經元生長因子    Fibroblast Growth Supplement-animal component free
神經前體細胞分化生長因子    Fibroblast Growth Supplement-2
 少突膠質前體細胞生長因子    Tonsil Epithelial Cell Growth Supplement
 少突膠質細胞生長因子    Oral Keratinocyte Growth Supplement
 少突膠質前體分化生長因子    Colonic Epithelial Cell Growth Supplement
 雪旺細胞生長因子    Bronchial Epithelial Cell Growth Supplement
 星形細胞生長因子    Small Airway Epithelial Cell Growth Supplement
 星形細胞生長因子-動物    Skeletal Muscle Cell Growth Supplement
小膠質細胞生長因子    Epithelial Cell Growth Supplement
巨噬細胞生長因子    Epithelial Cell Growth Supplement-2
 角質細胞生長因子    Epithelial Cell Growth Supplement-animal
 角質細胞生長因子（不含 BPE)    Mesangial Cell Growth Supplement
 角質細胞生長因子（不含動物成分）    Urothelial Cell Growth Supplement
 黑色素細胞生長因子    Prostate Epithelial Cell Growth Supplement
 黑色素細胞生長因子（不含TPA)     Osteoblast Growth Supplement
成纖維細胞生長因子    Chondrocyte Growth Supplement
成纖維細胞生長因子-sf    Synoviocyte Growth Supplement
成纖維細胞生長因子（不含動物成分）    Nucleus Pulposus Cell Growth Supplement
成纖維細胞生長因子-2    Hepatocyte Growth Supplement
扁桃體上皮細胞生長因子    Slate Cell Growth Supplement
口腔角質細胞生長因子    StemGS? Human Embryonic Stem Cell Growth Supplement 50X 
結腸上皮細胞生長因子    Xenofree Human Pluripotent Stem Cell Growth Supplement 50X
 支氣管上皮細胞生長因子    Cardiac Myocyte Growth Supplement
 小氣道上皮細胞生長因子    Corneal Epithelial Cell Growth Supplement