北京冬歌博業生物科技有限公司

    主要經營:elisa試劑盒,進口試劑,進口血清,進口細胞因子等;

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    北京現貨人胚腎細胞/293T科研

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    • 北京冬歌博業生物科技有限公司
    • 2018-05-03 16:23:08
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    【簡單介紹】

    我司主要經營細胞株、品牌試劑代理、抗體定制、進口試劑盒、多肽定制、實驗技術服務、各種實驗器材、實驗耗材器皿等。

    【詳細說明】

    人胚腎細胞/293T科研

    保存:4℃保存一年,-20℃*保存
    用途:可用于科研實驗培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。

    歡迎或索取原版說明書.Q:2507862940 :/

    人胚腎細胞/293T科研

    培養操作
    1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

     2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
         1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

         2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  

         3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

         4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

     3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

        1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml *,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

        2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

        3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


    注意事項:
    1. 收到細胞后先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們。
    2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。
    3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養,隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
    4. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
    5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和公司技術部溝通交流。
    6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。

        
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