1、取血

① 血液標本的采集  a、毛細血管采血法  b、靜脈采血法  c、從人體采血常取自耳垂邊緣或無名指側面

② 常用血液標本抗凝劑及其使用選擇a、檸檬酸鈉（*）；b、草酸鈉（乙二酸的鈉鹽）；c、雙草酸鹽抗凝劑 ；d、肝素（含硫酸基團的粘多糖）；e、乙二胺四乙酸（EDTA）鹽

③ *滴血棄去不用，再由玻片一端承接約3mm直徑的血滴，將此玻片保持水平。

2、涂片

① 玻片準備

a、 載玻片：取新載玻片或一般將用過的載玻片先用洗衣粉水溶液煮沸2分鐘，又由流水沖洗，再經清潔液浸泡并翻動，約過1小時或過夜，用流水反復沖洗，zui后入95%酒精浸泡約1小時。取出，以潔凈布巾夾持玻片邊緣擦干備用，或者使用無菌免洗載玻片。

b、 蓋玻片：一般使用新蓋玻片。

c、 推玻片：另取一個邊緣平整的潔凈載玻片為推玻片或直接另取一個蓋玻片做推玻片。

② 推片：將推玻片保持與載玻片30度角，按1的方向稍往后移與血滴接觸，即可見血液沿推片下緣散開，再以一定均勻的速度沿載玻片平面平穩的向2的方向滑動，至血液鋪完血膜為止。

③ 血涂片質量評價： 均勻、厚薄、頭體尾、邊緣、兩側（注意：血滴大，速度快、角度大 → 血膜厚）

3、染色

① 血膜要干透后才能染色，否則染色時易脫落。

② 用蠟筆在血膜兩頭劃線，平放于染色架上。

③ 染色時間與染液濃度、室溫及細胞多少有關，一般染液淡、染色時間長些效果好。

④ 染液不能過少，以防蒸發沉淀。

⑤ 沖洗時不能先倒掉染液，應以流水沖，防染料沉著。沖洗時間也不能長。

⑥ 染色過淡，可復染。

⑦ 染色過深可用水沖洗或浸泡，還可用甲醇脫色。

4、鏡檢

① 打開主電源，調整照明度。

② 將染色玻片放置在載物臺上。

③ 先用10×物鏡觀察，轉動粗調手輪，見到血涂片影形。轉動微調手輪即可得清晰的物像。

④ 將需要使用的物鏡放入光路，用粗調、微調旋鈕調整對血涂片的焦距。

⑤ 需用油鏡觀察時，在血涂片的觀察部位上加滴香柏油，用粗調、微調旋鈕調整好焦距。

⑥ 記錄觀察結果。

⑦ 用油鏡觀察的，實驗結束，須用擦鏡紙蘸少許二甲苯，擦拭鏡頭。

⑧ 關上電源開關。

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