關于標準曲線的擬合方法，直線、二次曲線、三次曲線、指數、對數等雖都可用于ELISA及其它生物學反應中的曲線擬合，但都只適用于曲線的一部分，有的適用于前半段，有的適用于后半段，有的適用于中心一段，而Logistic曲線則對曲線的全部都有較好的適用性。當然，假如用于定量，仍是在中心一段較 好。這些方法雖然沒有一種方法能夠通用，但也都能夠用。關鍵在于你的標準曲線做到了S形的哪一部分，你想檢測的樣品濃度在曲線的哪一部分。在S曲線的低濃 度部分能夠用乘冪方程很好的擬合，中低濃度部分能夠用直線方程，中心部分可用對數方程，而中后段可用四參數。

做標準曲線樣品檢測時有幾個問題需求留心
1、樣品的濃度等方針是根據標準曲線計算出來的，所以首要要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則后邊的實驗效果無從談起。
2、設置標準曲線樣品的標準濃度規劃要有一個比較大的跨度，而且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度規劃之內，包括上限和下限。而關于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中心斜度zui陡段，即曲線簡直成直線的規劃內。
3、選用倍比稀釋法制造標準曲線中的標準樣品濃度，這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會呈現較大的違背。
4、檢測標準樣品時，應按濃度遞加次序進行，以削減高濃度對低濃度的影響，前進準確性。
5、標準曲線的樣品數一般為7個點，但至少要保證有5個點。
6、做出的標準曲線相數因實驗要求不同而有所改變，但一般來說，相數R至少要大于0.98，關于有些實驗，至少要0.99甚至是0.999.

其實，在一個長的區間內，Logistic應該都能擬合得較為志向。但并不是說它就是的。實際上不僅是ELISA，其它許多生物學反應都是S形曲線，也都能夠用Logistic曲線擬合。但建模型是一回事，而用它來定量是另一回事。假如用來定量，S形曲線的中心段（較陡處）是比較好的，而兩端的平 坦部分計算誤差會大，有時甚至會很大。