小鼠腦微血管內皮細胞 返回列表頁

產品名稱：小鼠腦微血管內皮細胞

英文名稱：bEnd.3[BEND3]

培養基：DMEM-H*培養基：90%DMEM-H+10%FBS

形態：內皮細胞，長梭形，多角形，邊緣不規則，單層貼壁生長，背景干凈，不產色素，無空泡

生長條件：培養溫度37℃；氣體環境5%CO2+95%空氣生長特性：貼壁生長

儲存方式：液氮

分離基物：bEnd.3小鼠腦微血管內皮細胞是通過轉染NTKmT逆轉錄病毒載體轉化而來的，它表達了多瘤病毒中T抗原

傳代方法：

復蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速沒入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL*培養基的離心管內，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL*培養基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL*培養基的T25瓶中，放入培養箱培養。
細胞傳代：①將舊培養液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰霉（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰霉輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續消化），直接吸掉胰霉，加入5-6mL*培養基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當的*培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。；④注意培養基pH值變化和細胞密度，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%-90%時，重復傳代操作或者凍存。 

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