小鼠黑色素瘤細胞 返回列表頁

產品名稱：小鼠黑色素瘤細胞

英文名稱：B16

培養基：RPMI-1640*培養基：90%RPMI-1640+10%FBS

形態：貼壁，成纖維細胞樣，短梭型，換用DMEM-H培養細胞可以產黑色素，驗證過程中細胞有黑色素的產生，但是細胞分泌物也會增加，細胞狀態會變差

生長條件：培養溫度37℃；氣體環境5%CO2+95%空氣

生長特性：貼壁生長

儲存方式：液氮

應用領域：該細胞源于C57BL/6J小鼠黑色素瘤，可以產生黑色素，同基因小鼠體內移植可成瘤

傳代方法：

復蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃中取出放入PE手套中，迅速沒入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1分鐘內全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9ml犕耆嘌睦胄墓苣冢?000-1200rpm/min離心5分鐘，棄去上清液，用1-2mL*培養基重懸細胞。③然后將細胞懸液加入到含有5-6mL*培養基的T25瓶中，放入培養箱培養。 細胞傳代：①將舊培養液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰霉（0.25%Trypsin 0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰霉輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續消化），直接吸掉胰霉，加入5-6毫升*培養基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當的*培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。④注意培養基pH值變化和細胞密度，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%-90%時，重復傳代操作或者凍存。

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