當前位置:上海信裕生物科技有限公司>>原代細胞>>人原代細胞>> ScienCell人滑膜細胞
人滑膜細胞培養條件:DMEM(高糖)+10%FBS,傳代方法:按1:3傳代,凍存條件:90%FBS+10%DMSO,規格:25T,產品復蘇率:60培養兩天就能清晰看到軸突與樹突,培養時間可長達13-16天,質量控制:嚴格經過了細菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體檢測,產品庫存:現貨供應。
人滑膜細胞具體操作:
1).首先不加*,倒掉舊培養基加入少量新培養基洗1-2遍,(這是前奏,即為*步,目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。
2).然后再加入少量新培養基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養,以與后面*消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對*的敏感度了。)
3).吸干凈瓶內剩余液體,加入0.3ml左右的*潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的*消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉*與干凈彈頭里備用,加入新培養基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養,以與后面及前面的做對比。)這是第三步。
4).然后把前面剛吸出來的*重新加進去瓶里繼續消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的*,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉*,加入新培養基吹打。懸液傳入新瓶培養(根據實際情況你自己把握)。這是第四步。
其實還可以有第五步,對于特別難消化的細胞和對*特別敏感的細胞的話,你可以繼續加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態,更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能zui大限度地將*對細胞的損傷降到zui低,保證細胞的狀態能夠*。
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COS-7 SV40轉化的非洲綠猴腎
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