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    肝癌細胞;Hep3b

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    所  在  地上海市

    更新時間:2021-04-07 21:23:22瀏覽次數:852次

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    公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

    產品名稱

    生長特性

    貨號

    肝癌細胞;Hep3b

    貼壁生長

    EY-X63854

    細胞名稱  肝癌細胞;Hep3b
    形態特性: 上皮細胞樣

    生長特性: 貼壁生長

    特征特性: Hep-3b細胞建系于1979年,源自一位患有肝癌的7歲黑人男童。該細胞產生甲胎蛋白(alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原(BHsAg)、白蛋白、巨球蛋白、α-抗(alphal-antitrypsin)、轉鐵蛋白、補體(C3)、C3活性載體,纖維原等,具有廣泛的研究價值。

    培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

    傳代方法: 1:4~1:6傳代,每周換液2次

    傳代情況: C2

    凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

    支原體檢測: 培養法(-)
    ?
    冷凍保存細胞之方法
    冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
    冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
    實驗要點及說明:
    1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
    2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
    3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
    4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
    5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
    實驗報告:
    一、分離與培養:
    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
    4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
    5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
    二、免疫熒光鑒定:
    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
    電壓門控鉀通道抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人腦星形膠質母細胞瘤;U-118MG形態特性: 混合形voltage-gated potassium channel antibody

    瘤病16型E6蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞(抗CD3);OKT3形態特性: 淋巴母細胞樣papillomavirus 16 E6 protein

    檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠骨肉瘤成骨細胞;K7M2wt[K7M2-WT]形態特性: Digoxin

    游離丙型肝炎病核心抗原檢測試劑盒細胞名稱: 人膀胱移行細胞癌;SW780[SW-780,SW780]形態特性: 上皮樣;多角Free hepatitis C virus core antigen

    白介素8受體β檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉化的人B淋巴細胞;KMYF形態特性: 淋巴母細胞樣Interleukin 8 Receptor Beta

    RAR相關孤兒素受體γ檢測試劑盒細胞名稱: 人膀胱移行細胞癌;UM-UC-3形態特性: 上皮樣;多角RAR Related Orphan Receptor Gamma

    抗磷脂IgG抗體檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉化的人B淋巴細胞;KMYB形態特性: 淋巴母細胞樣anti-phospholipid IgG antibody

    抗磷脂IgM抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人膀胱移行細胞癌;J82形態特性: 上皮細胞樣anti-phospholipid IgM antibody

    白細胞抗原F檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉化的人B淋巴細胞;KMYM形態特性: 淋巴母細胞樣human leucocyte antigen F

    流行性腦膜炎球菌抗體檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉化的人B淋巴細胞;KMY0901形態特性: 淋巴母細胞樣Epidemic Meningococcus antibody

    3羧基4甲基5丙基2呋喃基檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉化的人B淋巴細胞;KMY0902形態特性: 淋巴母細胞樣3 carboxy 4 methyl 5 propyl 2 furyl

    人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病IgG抗體檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉化的人B淋巴細胞;KMY0904形態特性: 淋巴母細胞樣Human T-lymphotropicvirusⅠ IgG

    干擾素誘導蛋白44檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉化的人B淋巴細胞;KMY0905形態特性: 淋巴母細胞樣interferon-inducible protein 44

    酪氨蛋白激酶受體ErbB3檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉化的人B淋巴細胞;KMY0906形態特性: 淋巴母細胞樣Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3

    CD33分子檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉化的人B淋巴細胞;KMY0910形態特性: 淋巴母細胞樣Cluster of differentiation 33

    外異蛋白A檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉化的人B淋巴細胞;KMY0909形態特性: 淋巴母細胞樣Ectodysplasin A

    核因子紅細胞2相關因子2檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉化的人B淋巴細胞;KMY0903形態特性: 淋巴母細胞樣Nuclear factor erythroid 2-related factor 2
    人肝癌細胞;Hep3b杯莧甾17086-76-9英文名:Cyasterone  

    英文別名:(22R,24S,25S,28R)-2β,3β,14,20,22,28-Hexahydroxy-6-oxo(26-13C)-5β-stigmasta-7-ene-26-oic acid γ-lactone  

    CAS登錄號:17086-76-9

    分子式:C29H44O8

    分子量:520.65

    分子結構:

    外觀:白色針晶粉

    規格:20 mg/支

    純度:≥ 98%

    用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

    提取來源:莧科杯莧屬植物川牛膝(Cyathula officinalis Kuan.)的干燥根

    溶解性:溶于、乙醇,DMSO。

    熔點:164-166℃

    旋光度:+64.5°()

    藥理藥效:養血舒筋, 祛風除濕。

    貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

    有效期: 2年
    操作步驟:
    1、貼壁細胞的消化
    ①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
    ②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
    ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
    化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
    ④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
    ⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
    2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

     

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