胸腺激酶缺陷細胞；143BTK- 返回列表頁

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究，作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹：

細胞名稱  胸腺激酶缺陷細胞；143BTK-
形態特性: 上皮細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 143B細胞是一株人的胸腺激酶缺陷細胞系，由WistarInstitute制備，為美國細胞系，僅可作為研究用，不能用于商業目的。

培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: C97

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
?
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Stenotrophomonas maltophilia (Hugh) Pallero ..細胞名稱: 雜交瘤細胞株；Fi-14F1 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Arthrobacter ilicis (Mandel et al.) Collins ..細胞名稱: 雜交瘤細胞株；2B5 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Zygosaccharomyces rouxii (Boutroux) Yarrow, ..細胞名稱: 雜交瘤細胞株；1D7 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Dichotomicrobium thermohalophilum Hirsch an ..細胞名稱: 雜交瘤細胞株；4B7 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

freeze-dried細胞名稱: GY-PCV2-PK15細胞株；GY-PCV2-PK15 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 雜交瘤細胞株；8F9H3 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Torula herbarum Link : Fries細胞名稱: 抗人CD146雜交瘤細胞株；4-F10（IgG1） MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Homo sapiens, human細胞名稱: 雜交瘤細胞株；5B8 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Blastobotrys proliferans Marvanova細胞名稱: 雜交瘤細胞株；5D9 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Fusarium culmorum (Smith) Saccardo細胞名稱: 雜交瘤細胞株；8H7 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Rattus norvegicus, rat細胞名稱: 雜交瘤細胞株；STMN1-3P9 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Penicillium corylophilum Dierckx, anamorph細胞名稱: 雜交瘤細胞株；P24-3B9 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hanse ..細胞名稱: 雜交瘤細胞株；P24-2F4 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Rattus norvegicus, rat細胞名稱: 雜交瘤細胞株；NGAL-4F6 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)11%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 雜交瘤細胞株；NGAL-3B5 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 雜交瘤細胞株；1A4 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
胸腺激酶缺陷細胞；143BTK-假單胞cfc選擇性培養基添加劑規格：1ml/支*5用途：每支添加于200ml HB8689中

布魯氏菌培養基規格：250g用途：用于布魯氏菌分離培養

蛋白質快速檢測試劑盒拉丁屬名：食物種類： 乳及乳制品、奶粉、液態奶。

DNA酶瓊脂規格：100g用途：用于核糖核酶檢測

含225ml 緩沖蛋白胨水（BPW）均質袋規格：10個/包用途：用于沙門氏菌、阪崎桿菌制樣和前增菌培養

BBL液體培養基規格：250g用途：用于雙歧桿菌增菌培養
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落， 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養液重新懸浮細胞，即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。