胚胎皮膚成纖維細胞；HES 返回列表頁

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究，作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹：

細胞名稱  胚胎皮膚成纖維細胞；HES
形態特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞系來源于一男性胚胎的皮膚組織。2005年由中國科學院昆明細胞庫建立。

培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次

傳代情況: P3

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 熒光法（-）
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Kayaflavone

CAS No.：481-45-8

中文名：榧黃素

分子式：C33H24O10

黨參 訂購|咨詢 　黑素瘤細胞黏附分子(MCAM) 規格： 0.5g

訂購|咨詢 　黑素瘤衍生亮拉鏈額外核因子(MLZE) 規格： 100mg

（牛血） 訂購|咨詢 　黑素瘤缺乏因子1(AIM1) 規格： 150BP 單位/支

榧子 訂購|咨詢 　黑素瘤缺乏因子2(AIM2) 規格： 3g

長梗冬青苷 訂購|咨詢 　鋅指同源框蛋白1B(ZFHX1B) 規格： 20mg

對基水楊 訂購|咨詢 　鋅指同源框蛋白4(ZFHX4) 規格： 100mg

連翹酯苷B 訂購|咨詢 　鋅結合α2糖蛋白1(αZGP1) 規格： 20mg

木通苷B（荷苞花苷B） 訂購|咨詢 　鋅結合α2糖蛋白1(αZGP1) 規格： 20mg/支

糠 訂購|咨詢 　短蛋白聚糖(BCAN) 規格： 20mg

亞藍 訂購|咨詢 　短腭肺鼻腔上皮癌關聯蛋白2(SPLUNC2) 規格： 250mg

前列腺素B1 訂購|咨詢 　短腭肺鼻腔上皮癌關聯蛋白3(SPLUNC3) 規格： 見標示量

地瓜藤 訂購|咨詢 　物細胞內通道蛋白1(CLIC1) 規格： 1g

卡前列酯 訂購|咨詢 　離子通道輔助蛋白1(CLCA1) 規格： 30mg

阿利坦酯混合物 訂購|咨詢 　筑絲蛋白1(TEKT1) 規格： 20mg

馬來依那普利 訂購|咨詢 　筑絲蛋白3(TEKT3) 規格： 100mg

毛兩面針素 訂購|咨詢 　筑絲蛋白4(TEKT4) 規格： 20mg

2基4 訂購|咨詢 　筑絲蛋白5(TEKT5) 規格： 50mg

土 訂購|咨詢 　集鈣蛋白(CASQ) 規格： 200mg

PDCD2L/MGC13096  程序性細胞死亡2抗體    現貨供應 0.2ml CFDA SE;Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester

SLTM  轉綠調節因子SLTM抗體    現貨供應 0.2ml CAPE (Caffeic Acid Phenethylester)

GPR65  G蛋白偶聯受體65抗體    現貨供應 0.2ml Sulfameter

AX2R/LOC389289  膜粘連蛋白2受體抗體    現貨供應 0.2ml Amitraz

NADE/NGFRAP1  神經生長因子受體相關蛋白1抗體    現貨供應 0.2ml Amitraz

NRH2  死亡結構域蛋白NRH2抗體    現貨供應 0.2ml Citric acid monohydrate

PGRPS  肽聚糖識別蛋白1抗體    現貨供應 0.2ml Salubrinal

Porimin  前細胞脹亡受體誘導膜損傷蛋白抗體    現貨供應 0.2ml Primaquine phosphate

真空油脂III  進口、國產  英文名稱:GreaseofhightemperatureIII  含量:2.5N，200目

真那氏綠  進口、國產  英文名稱:JanuˊsgreenB  含量:超純，99%

正丁  進口、國產  英文名稱:Sodiumbutyrate  含量:CP，98%

正丁異戊酯  進口、國產  英文名稱:Isoamylbutyrate  含量:色標

正二十八  進口、國產  英文名稱:Octacosane  含量:AR，99%

正二十七  進口、國產  英文名稱:Heptacosane  含量:AR，99%

正釩  進口、國產  英文名稱:Sodiumorthovanadate  含量:CP

正  進口、國產  英文名稱:TSP  含量:特純，98%

正硼  進口、國產  英文名稱:Boricacid  含量:高純，98%

正三十六  進口、國產  英文名稱:Hexatriacontane  含量:AR，39%
胚胎皮膚成纖維細胞；HES醛類中和劑管規格：9ml*20支/包用途：用于消劑的中和

Half-Fraser培養基顆粒規格：225ml/袋*10用途：用于李氏菌的增菌培養

CC瓊脂添加劑規格：1ml/支*5用途：添加于CC瓊脂中

霍格蘭營養液（缺磷）規格：250g用途：用于植物無土栽培營養液。

藥敏紙片規格：5ug/片，20片/瓶用途：

玫瑰紅鈉瓊脂平板（9cm）規格：10個/包用途：用于霉菌、酵母菌計數
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落， 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養液重新懸浮細胞，即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。