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    肝癌細胞;QGY-7703QGY7703

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    產品型號

    品       牌其他品牌

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    所  在  地上海市

    更新時間:2021-04-07 19:39:37瀏覽次數:631次

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    細胞名稱  肝癌細胞;QGY-7703[QGY7703]
    形態特性: 上皮細胞樣

    生長特性: 貼壁生長

    特征特性: 該細胞系來自35歲女性的肝癌。染色體數目變化大,異倍體多。免疫熒光間接法AFP陽性反應。異體移植能力強。亞顯微結構方面,核與細胞質的比例高,大的多形核和多種細胞器亞顯微結構改變。在ConA作用下凝集。倍增時間約為20.5小時。用Northernblot方法,未能檢測到細胞中1.3kbLFIRE-1/HFREP-1mRNA的表達。

    培養條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%

    傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。

    傳代情況: PN

    凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

    支原體檢測: 陰性?

    產品名稱

    肝癌細胞;QGY-7703[QGY7703]

    生長特性

    貼壁生長

    貨號

    EY-X63542

    產品特點:
    1、 使用方便:不需昂貴設備。
    2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
    3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
    4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
    5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
    6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
    7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
    8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 
    培養操作步驟
    1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
    2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片); 
    3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
    4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中; 
    5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
    實驗要點及說明:
    1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
    2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
    3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
    4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
    5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
    操作流程:
    1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
    1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
    1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
    1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
    1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
    1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
    1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
    1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
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    Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 雜交瘤細胞;TBCD6 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

    Leishmania infantum Nicolle細胞名稱: 雜交瘤細胞;TBEA8 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

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    Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 雜交瘤細胞;TBCA6 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

    Grammothele subargentia (Spegazzini) Rajche ..細胞名稱: 雜交瘤細胞;CT-1G7 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

    Phytophthora cinnamomi Rands細胞名稱: 雜交瘤細胞;C9D11 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

    Prevotella tannerae Moore et al.細胞名稱: 雜交瘤細胞;2C RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

    Eurotium repens var.columnaris Varshney ..細胞名稱: 雜交瘤細胞;1B12株 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

    freeze-dried細胞名稱: 雜交瘤細胞;4A10 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

    Mus musculus, mouse細胞名稱: 雜交瘤細胞;15B8 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

    Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 雜交瘤細胞;19A4 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

    Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱喉表皮樣癌細胞;HEp-2-NS1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

    Colletotrichum acutatum Simmonds, anamorph細胞名稱: 雜交瘤細胞;3G4 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

    Schizosaccharomyces pombe Lindner細胞名稱: 雜交瘤細胞;2B1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

    Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 高轉移潛能肝癌細胞;MHCC97H-GFP-LC3 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

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    肝癌細胞;QGY-7703[QGY7703]人抗線粒體抗體(AMA)ELISA試劑盒RatCyclin-D2ELISAKit產品規格:48T/96T。

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