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CK DRGelisa試劑盒說明書

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更新時間:2019-01-16 17:18:56瀏覽次數:559次

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CK DRGelisa試劑盒說明書

Human Creatine Kinase, CK ELISA Kit

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人肌酸激酶(CK)DRGelisa試劑盒 Human Creatine Kinase, CK ELISA Kit
CK DRGelisa試劑盒說明書【實驗用途】CK,肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)。CK通常存在于動物的心臟、肌肉以及腦等組織的細胞漿和線粒體中,是一個與細胞內能量運轉、肌肉收縮、ATP再生有直接關系的重要激酶,它可逆地催化肌酸與ATP之間的轉磷?;磻?。肌酸激酶有四種同功酶形式:肌肉型(MM)、腦型(BB)、雜化型(MB)和線粒體型(MiMi)。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(biotin)標記。樣品和標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
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操作流程:
(1)CK DRGelisa試劑盒說明書待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
試劑盒組成及試劑配制 :
1.CK DRGelisa試劑盒說明書 酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人痢疾內阿米巴抗原ELISA Kit  *

人鏈激酶(SK)ELISA Kit  *

人亮氨酰氨基肽酶(LAP)ELISA Kit  *

人淋巴毒素α(LTA)ELISA Kit  *

人淋巴毒素β(LTB)ELISA Kit  *

人淋巴細胞功能相關抗原2(LFA-2/CD2)ELISA Kit  *

人淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA Kit  *

人淋巴細胞抗原6復合物基因座A(Ly6a)ELISA Kit  *

人淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA Kit  *

人淋巴細胞因子ELISA Kit  *

人磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)ELISA Kit  *

人磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA Kit  *
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CK DRGelisa試劑盒說明書腦膜細胞 原裝/進口 200 µg

腎實質細胞5 ×105次方(1ml)  200 µg

腎實質細胞 * 10 µg

腎系膜細胞5 ×105次方(1ml) 原裝/進口 1 x 10^6 cells/vial

腎系膜細胞5 ×105次方(1ml)  5 x 10^6 cells/vial

腎系膜細胞5 ×105次方(1ml) * 10 x 10^6 cells/vial

腎系膜細胞 原裝/進口 20 reactions

腎小管上皮細胞  200 µg

 

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