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ApoB100 DRGelisa試劑盒說明書

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更新時間:2019-01-22 08:48:18瀏覽次數:1563次

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ApoB100 DRGelisa試劑盒說明書【實驗用途】S-100蛋白是一組低分子量的鈣結合蛋白,因其在中性飽和硫酸銨中溶解而得名。目前,共發現約20種結構與功能相似、存在于不同組織、可調節細胞內和細胞外Ca2+的S-100蛋白。其中S-100B蛋白是一種分子量為21 ku的酸性蛋白,其為由2個β亞單位組成的二聚體,經腎臟清除,半衰期約2 h;它在腦組織中含量豐富,遠高于其他組織。S-100B具有廣泛的生物學活性,在細胞增生、分化、基因表達、細胞凋亡中具有重要作用,但其生理意義尚未*闡明。正常情況下,S-100B蛋白不能通過血-腦屏障進入血液,但在一些病理情況下可檢測到血清S-100B升高。目前,關于S-100B蛋白通過血-腦屏障的確切機制仍不清楚。研究表明:S-100B可作為惡性色素瘤的輔助診斷和療效評價指標,以及一些神經系統疾病的檢測指標。近年來,S-100B被廣泛應用于評價腦外傷、腦出血、缺血性腦血管病、麻醉、休克等引起的腦損傷。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(biotin)標記。樣品和標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
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操作流程:
(1)ApoB100 DRGelisa試劑盒說明書待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
試劑盒組成及試劑配制 :
1.ApoB100 DRGelisa試劑盒說明書 酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
pDdGal-17(pDdGal17)  *

pDendra2  *

pDendra2-C(pDendra2C)  *

pDendra2-N(pDendra2N)  *

pDest-544(pDest544)  *

pDEST10  *

pDEST15 Gateway(pDEST15Gateway)  *

pDEST17(60908-2416)  *

pDEST20(60908-2417)  *

pDEST22 (60908-2418)  *

pDEST26  *

pDEST27  *
[Ile-Ser]-Bradykinin (T-Kinin)Ile-Ser-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg

[Leu116]-Prepro-Neuromedin U (104-136) (human)Phe-Leu-Phe-His-Tyr-Ser-Lys-Thr-Gln-Lys-Leu-Gly-Leu-Ser-Asn-Val-Val-Ser-Ser-Val-Val-His-Pro-Leu-Leu-Gln-Leu-Val-Pro-His-Leu-His-Glu

[Leu13] Motilin, human, porcinePhe-Val-Pro-Ile-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-Arg-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly-Gln

[Leu144, Arg147]-PLP (139-151), [L144, R147-PLP(139-151)]His-Ser-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-Arg-Pro-Asp-Lys-Phe

[Leu144,Arg147]-Myelin Proteolipid Protein(139-151)Ser-His-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-Arg-Pro-Asp-Lys-Phe

[Leu144]-PLP (139-151), L144-PLP(139-151)His-Ser-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-His-Pro-Asp-Lys-Phe

[Leu15]-Gastrin I (human)Pyr-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Leu-Asp-Phe-NH2

[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (13-36) (human, rat)Pro-Ala-Glu-Asp-Met-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2

[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (human, rat)Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Met-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2

[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (porcine)Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Leu-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2

[Leu31,Pro34]-Peptide YY (human)Tyr-Pro-Ile-Lys-Pro-Glu-Ala-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Asn-Arg-Tyr-Tyr-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Tyr-Leu-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2
ApoB100 DRGelisa試劑盒說明書大腸桿菌DH5α感受態細胞   *

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