蜂王漿是的****可供人類直接服用的高活性成分的超級營養食品。 10- 羥基-2- 癸烯酸(10-HDA)是蜂王漿有的一種不飽和脂肪酸,由于這種酸在自然界的其它物質中沒有,只存在于蜂王漿中,所以也稱為王漿酸。分離出的純王漿酸呈白色晶體,在新鮮的蜂王漿中多以游離形式存在,性質比較穩定,具有很好的殺菌、抑菌、抗疲勞、抗衰老作用和抗癌、抗放射的功能,為此許多保健食品均添加有蜂王漿。因此作為評價蜂王漿及其制品質量優劣的主要指標之一的10-HDA 含量測定顯得尤其重要。至今為止,10-HDA 含量測定有薄層掃描法、分光光度法、氣相法、液相法,且多見于分析蜂王漿中的10-HDA 。薄層掃描法、分光光度法專屬性和準確性較差,氣相法處理繁瑣,目前*為通用的是H P L C法。液相法處理簡單、結果準確,本公司基于以上情況,建立了超聲提取、冷藏沉淀后,用對羧基甲酸乙酯做內標,反相液相色譜法測定蜂王漿及其制品中1 0 -H D A 含量的方法,取得了令人滿意的結果。
一、主要性能特點:
1)、蜂王漿中葵烯酸檢測分析液相色譜儀LC-3000C整套系統由P3000高壓(二元梯度)、UV3000分光檢測器、分析型動態高壓混合器、進樣閥、溶劑托盤、色譜柱、反控色譜工作站軟件等組成;安裝、調試及使用都非常簡單。
2)、P3000高壓是以CPLD技術為核心,由單片機控制的高精密系統。全數字頻率發生系統,*的馬達驅動系統友好的人機顯示界面使操作很方便,*的泵頭及單項閥設計思路,融匯了當今世界上***的經驗,使該系統在各種條件下都能保證輸液的精度及重復性。
3)、UV3000是一種分光檢測器,可以匹配任何,適用于化學分析、農、制、化工等領域有著廣泛的應用。采用了全數字、高集成化設計理念,大大降低儀器的噪聲;基于數字信號傳輸和處理,該檢測器的信號可直接輸入到計算機的串行口進行采集,甩掉了傳統儀器**使用的數據采集卡!
二、儀器主要配置和檢測分析條件:
(1). 主要儀器配置:
1、LC-3000有效液相色譜儀;
2、色譜柱:C18,250*4.6*10 或250*4.6*5
3、高速離心機(大于4500r/min;50ml)
4、超聲波震蕩儀;
5、渦旋混合器;
6、分析天平(萬分之一);7、溶劑過濾器(帶0.45um有機、水系過濾膜和真空泵);
(2)、主要試劑:
純凈水(二次蒸餾水) 、
.甲醇:分析醇
乙醇:優級純
.內標物:對羥基甲酸甲酯含量99.0%
.10-HAD標準品:99.0%以上。使用前應在放有濃的減壓干燥器內減壓干燥24h
.10-HAD標準溶液:取干燥后的10-HAD標準品約25mg,精密稱定,加無水乙醇溶解并移入1000ml容量瓶中,用無水乙醇稀釋至刻度,搖勻。此溶液每毫升含內標物約0.65mg。
(C=0.03mol/L):量取0.1mol/L100ml,加入200ml重蒸餾水中。
(3).色譜條件:
色譜柱為Kromasil C18 柱,流動相為V(甲醇):V(水):V(磷酸)=55:45:0.2,流速1.0ml/min,對羧基甲酸乙酯作內標,檢測波長210nm。本法簡單、快速、準確,重現性好,回收率高(97.6%~101.8%)。
(4).樣品處理
樣品解凍至室溫后用玻璃棒攪勻,取約0.5g,置于已稱定的50ml容量瓶中,精密稱定,加0.03mol/L1ml和水2ml,置漩渦混合器上混合使樣品溶解,加無水乙醇30ml,邊加邊輕輕搖動,再精密加入內標溶液10ml,并用無水乙醇稀釋至刻度,搖勻,立即置超聲波中超聲15min,或置漩渦混合器上振蕩15min,取出,在3000r/min下離心10min后測定。如不能及時測定,應放置在冰箱中冷藏待測。