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廈門慧嘉生物科技有限公司
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廈門慧嘉生物*經營人抗巨細胞病毒抗體IgM(anti-CMV IgM)ELISA試劑盒。誠信經營，價格實惠，服務周到，質量有保證。歡迎廣告老師來詢！: :
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產品名稱： 人抗巨細胞病毒抗體IgM（anti-CMV IgM）ELISA Kit
產品英文： Human anti-cytomegalovirus IgM antibody,anti-CMV IgM ELISA Kit
產品規格： 96T
產品類別： 人肝炎類ELISA試劑盒[Human hepatitis ELISA Kit]
人抗巨細胞病毒抗體IgM（anti-CMV IgM）酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用
特異性：本試劑盒可檢測人Anti-CMV IgM，且與其他相關抗體無交叉反應。
有效期：6個月
預期應用：ELISA法定量測定人血清、血漿或其它相關生物液體中Anti-CMV IgM含量。
說明
1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）。
2．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3．中、英文說明書可能會有不*之處，請以英文說明書為準。
4．剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響。
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 酶結合物（Conjugate）：2×6 ml/瓶。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：2×6 ml/瓶。
4. 陽性對照（Positive Control）：1×0.5ml/瓶。
5. 陰性對照（Negative Control）：1×0.5ml/瓶。
6. 底物溶液A（Substrate A）：1×7 ml/瓶。
7. 底物溶液B（Substrate B）：1×7 ml/瓶。
8. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×15ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋20倍。
9. 終止液（Stop Solution）：1×7ml/瓶。
需要而未提供的試劑和器材
1. 標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器
6. 蒸餾水，容量瓶等
標本的采集及保存
1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或室溫過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
操作步驟
實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣：分別設空白孔，不加任何溶液；設陰性對照孔2孔，加陰性對照100μl；設陽性對照孔2孔，加陽性對照100μl；余孔加100μl*，然后直接加待測樣本5μl。注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃放置30分鐘。
2. 棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，200μl/每孔，甩干。
3. 每孔加酶結合物100μl（空白孔除外），充分混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃放置20分鐘。
4. 棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，200μl/每孔，甩干。
5. 依序每孔加底物溶液A和B各50μl，37℃避光顯色10分鐘。
6. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
7. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
注：
1. 用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。
5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將*的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。
自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
計算
1. 目測法：比臨界對照顯色深的樣本為陽性，比臨界對照顯色相同或顯色淺的為陰性。
2. 酶標儀測定：判斷值（OD值）=陰性對照平均OD值×2.1，樣品OD值大于判斷值為陽性，小于等于為陰性。陰性對照平均OD值小于0.05時，按0.05計算。
注意事項
1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，*使用排槍加樣。
4. 如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數。
5. 在配制檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。
6. 底物請避光保存。
7. 不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
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