022211 月桂基硫酸鹽胰蛋白胨-MUG肉湯
(LST-MUG Broth)
用 途:
月桂基硫酸鹽胰蛋白胨用于致病性大腸桿菌(包括O157:H7)的鑒別性試驗(GB/T4789.36-2008和SN/T0973-2000)。
原 理:
胰蛋白胨提供碳源和氮源滿足細菌生長的需求;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;乳糖是大腸菌群可發酵的糖類;磷酸二氫鉀和是緩沖劑;月桂基硫酸鈉可抑制非大腸菌群細菌的生長。大腸埃希氏桿菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide簡稱MUG)的β糖醛酸苷鍵,使其水解,釋放的4-甲基傘形酮在366nm紫外燈下產生藍白色熒光。97%的大腸埃希氏桿菌、10%的沙門氏菌以及少量的志賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶;而致病性大腸桿菌(包括O157:H7)不具有葡萄糖醛酸苷酶,因而不會產生熒光。
培養基配方(每升):
胰蛋白胨 20.0g
氯化鈉 5.0g
乳糖 5.0g
2.75g
磷酸二氫鉀 2.75g
月桂基硫酸鈉 0.1g
MUG 0.1g
最終pH 6.8±0.2
使用方法:
1、稱取本品35.7g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝于帶有小倒管的試管中,121℃高壓滅菌15min,待冷至常溫,備用。
2、樣品的處理及稀釋,略。
3、選用三個連續稀釋度的樣品稀釋液,每個稀釋度接種三管LST-MUG肉湯,每管接種1mL。
4、將試管放入到培養箱中36±0.1℃培養24h。
5、觀察結果:將培養基管置366nm紫外燈下約5cm處,以未接種培養物的LST-MUG培養基作空白對照,觀察有無藍白色熒光。空白對照管應無藍白色熒光,試驗管出現藍白色熒光為陽性反應。
質量控制:
質控菌株接種后于37℃培養24h結果如下
貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。
規 格:100g
參考文獻:
1.SN/T 0973-2000 中華人民共和國進出口商品檢驗行業標準 出口食品腸出血性大腸桿菌O157:H7檢驗方法
2.GB/T4789.36-2008 中華人民共和國國家標準 食品衛生微生物學檢驗 大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗