Transwell遷移服務 實驗耗材 返回列表頁

1．膜預處理
將48.5ml H2O +1.5ml 醋酸+150μL 鼠尾膠原置于50ml的離心管。在膜的粗糙面用鉛筆做標記，放入上述溶液中4度過夜。
實驗前將膜取出，放入裝有PBS的培養皿中漂洗一遍，再用饑餓培養基洗一遍，吸去培養基后加入新的饑餓培養基，放入37度培養箱中。
2. 處理細胞
將細胞消化，調濃度1×105個/ml，細胞遷移裝置下層加入166μl含有刺激因子的饑餓培養基。小心鋪好膜（粗面朝下），裝好塑料墊，固定上層裝置。上層加入100μl細胞懸液，遷移4-6h。
3. 固定
小心將膜取下來，在用PBS弄濕的濾紙上掛掉光滑面的細胞，在新的濾紙上粗面朝上放置，*晾干。然后再甲醇里粗面朝上固定5min，*晾干。
4. 染色
粗面朝下置于結晶紫染液中30min，取出膜用雙蒸水漂洗一遍，粗面朝上放在載玻片上，數細胞。
這個方法比transwell方便。與boyden chemper法類似。

1．膜預處理
將48.5ml H2O +1.5ml 醋酸+150μL 鼠尾膠原置于50ml的離心管。在膜的粗糙面用鉛筆做標記，放入上述溶液中4度過夜。
實驗前將膜取出，放入裝有PBS的培養皿中漂洗一遍，再用饑餓培養基洗一遍，吸去培養基后加入新的饑餓培養基，放入37度培養箱中。
2. 處理細胞
將細胞消化，調濃度1×105個/ml，細胞遷移裝置下層加入166μl含有刺激因子的饑餓培養基。小心鋪好膜（粗面朝下），裝好塑料墊，固定上層裝置。上層加入100μl細胞懸液，遷移4-6h。
3. 固定
小心將膜取下來，在用PBS弄濕的濾紙上掛掉光滑面的細胞，在新的濾紙上粗面朝上放置，*晾干。然后再甲醇里粗面朝上固定5min，*晾干。
4. 染色
粗面朝下置于結晶紫染液中30min，取出膜用雙蒸水漂洗一遍，粗面朝上放在載玻片上，數細胞。
這個方法比transwell方便。與boyden chemper法類似。