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JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit

JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

溫馨提示：見我司整理線粒體熒光探針產品專題。

產品標簽

Rhodamine 123 羅丹明123；JC-1；JC-10；CCCP；CAS：62669-70-9

產品信息

產品描述

JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒（JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit）是一種以JC-1為熒光探針，快速且靈敏的檢測細胞、組織或純化線粒體膜電位變化的試劑盒。因線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。因此本試劑盒可用于早期的細胞凋亡檢測。

JC-1 是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內，可以用來檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內，JC-1聚集在線粒體基質中形成聚合物，聚合物發出強烈的紅色熒光（Ex=585 nm, Em=590 nm）；不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失，JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中，產生綠色熒光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。JC-1不僅可用于定性檢測，因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測，因線粒體的去極化程度可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。

本試劑盒提供CCCP用作線粒體膜電位喪失的陽性對照。對于六孔板樣品，本試劑盒可檢測100個樣品。

產品包裝

保存與運輸方法

保存：-20℃保存，1年有效。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1. JC-1（200×）在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內，可以20～25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
2. 裝載完JC-1后用JC-1染色緩沖液（1×）洗滌時，使JC-1染色緩沖液（1×）保持4℃左右，此時洗滌效果較好。
3. JC-1探針裝載完并洗滌后盡量在30min內完成后續檢測。在檢測前需冰浴保存。
4. 請勿把JC-1染色緩沖液（5×）全部配制成JC-1染色緩沖液（1×），本試劑盒使用過程中需直接使用JC-1染色緩沖液（5×）。
5. 如果發現JC-1染色緩沖液（5×）中有沉淀，必須全部溶解后才能使用，可在37℃加熱促進溶解。
6. CCCP為線粒體電子傳遞鏈抑制劑，有毒，請注意小心防護。
7. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法【詳見懋康】

1. JC-1染色工作液制備
2. JC-1 染色工作液的量為1ml，其他培養器皿的JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。
3. JC-1（200×），按照每50μL JC-1（200×）加入8mL 超純水的比例稀釋JC-1。劇烈震蕩充分溶解并混勻JC-1。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5×），混勻后即為JC-1染色工作液。
4. JC-1（200×）用超純水（試劑盒提供）充分溶解混勻后，才可加入JC-1染色緩沖液（5×）。不可先配制JC-1染色緩沖液（1×）再加入JC-1（200×），這樣JC-1會很難充分溶解，會嚴重影響后續的檢測。
5. 陽性對照的設置
6. （10mM）推薦按1∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10μM，處理細胞20min。隨后按照下述方法裝載JC-1，進行線粒體膜電位的檢測。
7. 10μM CCCP處理20 min后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
8. 對于懸浮細胞
9. 對于貼壁細胞
10. 對于純化的線粒體

1. 熒光觀測和結果分析

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。

MX3204 JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒

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