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    L6細胞,大鼠成肌細胞

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    產品型號

    品       牌

    廠商性質生產商

    所  在  地上海市

    聯系方式:辛妍查看聯系方式

    更新時間:2017-10-26 17:53:36瀏覽次數:297次

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    經營模式:生產廠家

    商鋪產品:9950條

    所在地區:上海上海市

    聯系人:辛妍 (銷售)

    產品簡介

    上海研盟生物提供美國ATCC傳代細胞株“L6細胞,大鼠成肌細胞",進口來源,國內保種,活性保證,咨詢:.

    詳細介紹

     

    【友情提示】:產品價格與說明書請添加客服或來電詢價,索要說明書;

    產品名稱:L6細胞,大鼠成肌細胞

    細胞特性

    細胞名稱:L6大鼠成肌細胞
    組織來源:骨胳?。怀杉〖毎?br />培養條件:DMEM +10% FBS
    形 態:貼壁;成肌細胞
    背 景:該細胞是Yaffe在甲基膽蒽存在的情況下從大鼠大腿肌原代培養的zui初兩代細胞中分離得到的;在培養基中融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維,細胞融合的程度隨著代數的增加而下降,因此細胞應低代次冷凍并周期性地重新克隆以選擇融合能力強的細胞。該細胞應在達匯合狀態前傳代,以延緩細胞分化能力的喪失,如果讓培養容器中的細胞長滿,這株細胞的成肌組分將迅速耗盡。

    含量:>1x10的6次方 個/mL
    污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
    規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

    基本特性:
    描述:(1)所有細胞株購自ATCC;
    (2) 公司可提供新鮮或凍存細胞株;
    (3) 細胞株數量約 1000000個/瓶;
    (4) 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

    密度超過90%,并且細胞狀態很好時,則復溫后2個小時需要立即傳代,提供復蘇好的細胞株,貼壁及懸浮細胞形式,細胞狀態良好,飽滿、光澤度好,*,并提供細胞報價、所需培養基、種屬來源、組織來源、形態、背景資料等。

    細胞株培養的具體無菌技術要點:
    1. 實驗開始前,無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘*滅菌,用70%ethanol擦拭無菌操作臺面,并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后,才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株,即使培養基*相同也不可共用培養基,以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后,請將實驗物品拿出工作臺,用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應該讓無菌操作臺運轉10分鐘到15分鐘后,才能進行下一個細胞株的操作。
    2. 無菌操作工作的區域應保持清潔和寬敞,必要物品(試管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暫時放置,其它實驗用品使用完畢后應移出,有利于空氣流通。實驗用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內。實驗操作過程應在臺面的*無菌區域內完成,請勿在邊緣非無菌區域進行操作。
    3. 小心取用無菌實驗物品,避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處,也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后,請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身,傾斜大約45°角取用,盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。
    4. 工作人員應當首先注意自身安全,必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作,并選擇適當等級的無菌操作臺進行(至少是Class II)。操作過程中,應避免引起aerosol的產生,小心有毒性藥品,例如DMSO和TPA等,并避免針頭的傷害等等。
    5. 定期檢測下列項目:
    5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力
    5.2. CO2培養箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染(水盤的水需用無菌水,每周定時更換)。
    5.3. 無菌操作臺內的airflow壓力,定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜,預濾網(300小時/預濾網,3000小時/HEPA)。
    6. 水槽內可添加消毒劑(Zephrin 1:750),需定期更換水槽中的水。
     
    細胞用途:僅供科研使用。
                           


    L6細胞,大鼠成肌細胞復蘇方法

    1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內液氮迅速氣化而發生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。

    2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。

    3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養液,吹打使細胞懸浮。

    4.低速離心(500~1000轉/分)5分鐘,取上清后再重復用培養液漂洗、離心。

    5.加入培養液適當稀釋后,再移裝入培養瓶中,置溫箱培養,次日更換一次培養液后再繼續培養。

     我公司認為購買細胞的客戶有培養細胞的經驗,客戶收到細胞,原瓶里的培養液可以收集繼續使用,在*次消化傳瓶時,我們要求客戶留一瓶細胞繼續使用我們的培養液,其它瓶的細胞客戶可使用自己的培養液,這樣可減少由于細胞不適應培養液導致的細胞問題。
     

    來源有保障(世界*品牌),狀態且傳代次數好,經測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。每管含有細胞數>1000000個,具有高品質、高純度、高穩定性等特點,純化技術保證產品性能。
    運輸方式:活細胞運輸(T-25 flasks)。
    細胞純度:95%。
    細胞來源:ATCC等。
    包裝:內層無菌自封袋,防壓泡沫盒,外層防壓保溫氣泡袋,說明書。

    用途:本產品只提供給進一步的科研使用,不可應用于治療等其他方面。

    細胞凍存
    1.將細胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
    2.準備凍存液比例:50%FBS+40%培養基+10%DMSO(現用現配)
    3.加1.5凍存液在離心管中,將細胞吹打均勻,移入凍存管內.
    放入-20度冰箱2-4小時后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存.

     

    本公司的細胞培養操作規程,供參考
    一.培養基及培養凍存條件準備:
    1)準備DMEM培養基(DMEM,GIBCO,貨號11965-092),90%;胎牛血清,10%。
    2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
    3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
    二.細胞處理:
    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
    對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
    1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
    2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
    3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養液后吹勻。
    4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
    3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行,zui后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心,用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。

    傳代時間:2-3天 3-5天

    傳代比例:1:2~1:3  1:1~1:2

    細胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

    細胞實驗安全性:所有細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

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