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上海研盟生物科技有限公司
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上海研盟生物提供美國ATCC傳代細胞株“MDBK （NBL-1）細胞,牛腎細胞"，進口來源，國內保種，活性保證，咨詢：.
【友情提示】：產品價格與說明書請添加客服或來電詢價，索要說明書；
產品名稱：MDBK (NBL-1)細胞,牛腎細胞
細胞特性
細胞名稱：MDBK(NBL-1) 牛腎細胞
組織來源：腎；正常細胞
培養條件：RPMI-1640 +10% FBS
形態：貼壁；上皮細胞樣
含量：>1x10的6次方 個/mL
污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
基本特性：
描述：（1）所有細胞株購自ATCC；
（2） 公司可提供新鮮或凍存細胞株；
（3） 細胞株數量約 1000000個/瓶；
（4） 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
密度超過90%,并且細胞狀態很好時,則復溫后2個小時需要立即傳代，提供復蘇好的細胞株，貼壁及懸浮細胞形式，細胞狀態良好，飽滿、光澤度好，*，并提供細胞報價、所需培養基、種屬來源、組織來源、形態、背景資料等。
細胞名稱：MDBK (NBL-1)牛腎細胞
細胞描述：1957年２月18日，S.H. Madin和N.B. Darby從一只表觀正常的成年牛腎臟建立了MDBK細胞株。1973年這株MDBK細胞被牛病毒性痢疾病毒(BVDV)感染。 1982年發現了一株未被BVDV感染的MDBK細胞株。 這株細胞zui初來自ATCC 1967年７月第96代的凍存管。 這株MDBK細胞的后代經NVSL檢測，未發現被任何病毒污染的證據。 1982年８月，R.A. Van Deusen將其提供給ATCC時，已傳代至第110代。 這株細胞未被BVDV感染。 在本庫通過支原體檢測。
動物種別：牛
組織來源：腎；正常細胞
形態：上皮細胞
培養基和添加劑：RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。
REFERENCE：Madin SH , Darby NB Jr. Established kidney cell lines of normal adult bovine and ovine origin. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 98: 574-576, 1958. PubMed: 13567776 Bolin SR , et al. Survey of cell lines in the American Type Culture Collection for bovine viral diarrhea virus. J. Virol. Methods 48: 211-221, 1994. PubMed: 7989438 Loffler S , et al. CD9, a tetraspan transmembrane protein, renders cells susceptible to canine distemper virus. J. Virol. 71: 42-49, 1997. PubMed: 8985321 Russell DW , Miller AD . Foamy virus vectors. J. Virol. 70: 217-222, 1996. PubMed: 8523528
細胞用途：僅供科研使用。
MDBK (NBL-1)細胞,牛腎細胞復蘇方法
1．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內液氮迅速氣化而發生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。
2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。
3．剪開紗布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加10ml培養液，吹打使細胞懸浮。
4．低速離心（500～1000轉/分）5分鐘，取上清后再重復用培養液漂洗、離心。
5．加入培養液適當稀釋后，再移裝入培養瓶中，置溫箱培養，次日更換一次培養液后再繼續培養。
我公司認為購買細胞的客戶有培養細胞的經驗，客戶收到細胞，原瓶里的培養液可以收集繼續使用，在*次消化傳瓶時，我們要求客戶留一瓶細胞繼續使用我們的培養液，其它瓶的細胞客戶可使用自己的培養液，這樣可減少由于細胞不適應培養液導致的細胞問題。
來源有保障（世界*品牌），狀態且傳代次數好，經測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。每管含有細胞數>1000000個，具有高品質、高純度、高穩定性等特點，純化技術保證產品性能。
運輸方式：活細胞運輸（T-25 flasks）。
細胞純度：95%。
細胞來源：ATCC等。
包裝：內層無菌自封袋，防壓泡沫盒，外層防壓保溫氣泡袋，說明書。
用途：本產品只提供給進一步的科研使用，不可應用于治療等其他方面。
細胞凍存
１．將細胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養基＋１０％ＤＭＳＯ（現用現配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內．
放入－２０度冰箱２－４小時后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存.
MDBK (NBL-1)細胞,牛腎細胞本公司的細胞培養操作規程，供參考
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備DMEM培養基(DMEM，GIBCO，貨號11965-092)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，zui后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心，用血清重懸浮，加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
傳代時間：2-3天 3-5天
傳代比例：1:2~1:3 1:1~1:2
細胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細胞實驗安全性：所有細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
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