污水處理設備 污泥處理設備 水處理過濾器 軟化水設備/除鹽設備 純凈水設備 消毒設備|加藥設備 供水/儲水/集水/排水/輔助 水處理膜 過濾器濾芯 水處理濾料 水處理劑 水處理填料 其它水處理設備
上海研盟生物科技有限公司
上海研盟生物科技有限公司
上海研盟生物提供美國ATCC傳代細胞株“PA317小鼠成纖維細胞"，進口來源，國內保種，活性保證，咨詢：.
【友情提示】：產品價格與說明書請添加客服或來電詢價，索要說明書；
產品名稱：PA317小鼠成纖維細胞
細胞特性
細胞名稱：PA317 小鼠成纖維細胞
組織來源：胚胎
培養條件：DMEM +10% FBS
形 態：貼壁；成纖維細胞樣
背 景：PA317細胞株源自TK- NIH/3T3細胞，通過pBR322中的包裝結構DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉染構建而成。 通過感染或轉染將逆轉錄病毒載體導入這些細胞，結果生成可以感染許多哺乳動物細胞的雙嗜性載體顆粒。 這株細胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因導入人類。 可能因為用于構建這株細胞而轉入的DNA丟失，能夠包裝逆轉錄病毒載體的PA317細胞百分比隨傳代而減少。 在包含0.03 mM 次, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培養基中短暫(大約5天)選擇，可以選出保留了包裝功能的細胞。 選擇后，細胞應在HT培養基(0.03 mM 次,0.02 mM 胸苷)中培養4天，以稀釋殘留的氨甲喋呤。
含量：>1x10的6次方 個/mL
污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
基本特性：
描述：（1）所有細胞株購自ATCC；
（2） 公司可提供新鮮或凍存細胞株；
（3） 細胞株數量約 1000000個/瓶；
（4） 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
密度超過90%,并且細胞狀態很好時,則復溫后2個小時需要立即傳代，提供復蘇好的細胞株，貼壁及懸浮細胞形式，細胞狀態良好，飽滿、光澤度好，*，并提供細胞報價、所需培養基、種屬來源、組織來源、形態、背景資料等。
PA317小鼠成纖維細胞復蘇方法細胞用途：僅供科研使用。
1．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內液氮迅速氣化而發生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。
2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。
3．剪開紗布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加10ml培養液，吹打使細胞懸浮。
4．低速離心（500～1000轉/分）5分鐘，取上清后再重復用培養液漂洗、離心。
5．加入培養液適當稀釋后，再移裝入培養瓶中，置溫箱培養，次日更換一次培養液后再繼續培養。
我公司認為購買細胞的客戶有培養細胞的經驗，客戶收到細胞，原瓶里的培養液可以收集繼續使用，在*次消化傳瓶時，我們要求客戶留一瓶細胞繼續使用我們的培養液，其它瓶的細胞客戶可使用自己的培養液，這樣可減少由于細胞不適應培養液導致的細胞問題。
來源有保障（世界*品牌），狀態且傳代次數好，經測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。每管含有細胞數>1000000個，具有高品質、高純度、高穩定性等特點，純化技術保證產品性能。
運輸方式：活細胞運輸（T-25 flasks）。
細胞純度：95%。
細胞來源：ATCC等。
包裝：內層無菌自封袋，防壓泡沫盒，外層防壓保溫氣泡袋，說明書。
用途：本產品只提供給進一步的科研使用，不可應用于治療等其他方面。
細胞凍存
１．將細胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養基＋１０％ＤＭＳＯ（現用現配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內．
放入－２０度冰箱２－４小時后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存.
本公司的細胞培養操作規程，供參考
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備DMEM培養基(DMEM，GIBCO，貨號11965-092)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，zui后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心，用血清重懸浮，加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
傳代時間：2-3天 3-5天
傳代比例：1:2~1:3 1:1~1:2
細胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細胞實驗安全性：所有細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
研盟生物其他優質產品：
小鼠雜交瘤細胞，CD3
小鼠雜交瘤細胞，CD4
小鼠雜交瘤細胞，CD8
小鼠雜交瘤細胞，CHK1
小鼠雜交瘤細胞，CHUK
小鼠雜交瘤細胞，CIB1
小鼠雜交瘤細胞，CK1
小鼠雜交瘤細胞，C-Kit
小鼠雜交瘤細胞，Clenbuterol
小鼠雜交瘤細胞，CRYAB
小鼠雜交瘤細胞，cTnI
小鼠雜交瘤細胞，cTnT2
小鼠雜交瘤細胞，Cytokeratin 5
小鼠雜交瘤細胞，Cytokeratin(Pan)
小鼠雜交瘤細胞，DDR2
小鼠雜交瘤細胞，Desmin
小鼠雜交瘤細胞，Dynamin-1細胞名稱：P815小鼠肥大細胞瘤細胞細胞名稱：PA317 小鼠成纖維細胞
細胞描述：PA317細胞株源自TK- NIH/3T3細胞，通過pBR322中的包裝結構DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉染構建而成。 通過感染或轉染將逆轉錄病毒載體導入這些細胞，結果生成可以感染許多哺乳動物細胞的雙嗜性載體顆粒。 這株細胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因導入人類。 可能因為用于構建這株細胞而轉入的DNA丟失，能夠包裝逆轉錄病毒載體的PA317細胞百分比隨傳代而減少。 在包含0.03 mM 次黃嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培養基中短暫(大約5天)選擇，可以選出保留了包裝功能的細胞。 選擇后，細胞應在HT培養基(0.03 mM 次黃嘌呤,0.02 mM 胸苷)中培養4天，以稀釋殘留的氨甲喋呤。 Cells shipped from the ATCC have been selected in medium containing 0.03 mM hypoxanthine, 0.001 mM amethopterin (methotrexate), and 0.02 mM thymidine prior to freezing, and should be grown in HT medium for 4 days after receipt. 此后細胞不需選擇可以穩定至少1個月。
動物種別：小鼠
組織來源：胚胎
形態：成纖維細胞
培養基和添加劑：DMEM培養基(GIBCO,貨號12800017，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。
REFERENCE：Miller AD , Buttimore C . Redesign of retrovirus packaging cell lines to avoid recombination leading to helper virus production. Mol. Cell. Biol. 6: 2895-2902, 1986. PubMed: 3785217 Miller AD . DNA contructs for retrovirus packaging cell lines. US Patent 4,861,719 dated Aug 29 1989 Rosenberg SA , et al. Gene transfer into humans--immunotherapy of patients with advanced melanoma, using tumor-infiltrating lymphocytes modified by retroviral gene transduction. N. Engl. J. Med. 323: 570-578, 1990. PubMed: 2381442 Chin J Cell Mol Immunol 18(2):146-148, 2002 Shanghai Immunol Journal 23(1):16-19,2003
您感興趣的產品PRODUCTS YOU ARE INTERESTED IN
環保在線 設計制作，未經允許翻錄必究 .? ? ?
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
