用戶在初次使用小鼠elisa試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。
小鼠elisa試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠G蛋白偶聯受體(GPCR)水平。用純化的小鼠G蛋白偶聯受體(GPCR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入樣本及標準品,再與HRP標記的小鼠G蛋白偶聯受體(GPCR)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠G蛋白偶聯受體(GPCR)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠G蛋白偶聯受體(GPCR)濃度。
小鼠elisa試劑盒操作中的注意事項:
1、用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。
2、每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及終止液。測量時先用此孔調OD值至零。
3、為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
4、未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標記親和素工作液。
5、建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。