在實驗室中通過熟練的操作新工人的準確監督,遵守良好的無菌操作技術可以幫助減少支原體污染的風險。強烈建議準備所有的細胞污染事故的報告,以解決污染問題。本文威正翔禹/締一生物為您分析預防支原體污染的細胞培養方法。
測試文化污染
由于支原體的主要來源之一是從國外引進的細胞培養,建議從可靠的電池供應銀行的細胞。
在支原體污染的細胞培養的隔離區中的存在和缺乏獨立的孵化器的情況下,應只在有蓋的塑料盒瓶。不要使用盤子和啟封菜肴檢疫。在懷疑培養物的情況下,處理它們在后的所有其他細胞培養工作的工作結束時完成時,使用分離介質和試劑,zui后消毒層流罩后工作時盡量。
僅使用抗生素負責任
雖然用于細胞培養應消除所有的污染物理想抗生素,是無毒的宿主細胞,而不是與實驗干擾,沒有可用的抗生素滿足以上的標準。因此,在細胞培養的抗生素的應用應限制。相反,一個良好的無菌做法起著預防污染的重要作用。
在細胞培養物的微生物污染是無抗生素是通過在細胞培養基中混濁或顏色的變化檢測的。
在細胞培養使用抗生素的情況下,有四種可能:
1.對抗生素的敏感性。
2.抗生素抗性。
3.對抗生素局部阻力。
4.抗抗生素僅由支原體。
zui后一個是zui差的污染,因為支原體可以通過氣溶膠傳播。在抗生素敏感性的情況下,抗生素防止細菌和真菌的培養,但沒有能力從開始解除支原體。因此,連續使用抗生素為在細胞培養時間長,不僅是沒有幫助的,但也可引起更多的問題。然而,在原代培養中使用的抗生素(*/*),用于短期(前兩周)是至關重要的。由于抗生素是在介質中不穩定,強烈建議用新鮮培養基替換含抗生素培養基每隔兩三天。
丟棄或治療支原體污染的細胞
在其中真正有價值和稀有細胞支原體污染的情況下,建議對待他們,消除支原體感染。否則,建議丟棄支原體污染的細胞,因為它們被認為是污染的在實驗室源。
任何來源的檢疫新細胞
正如前面章節中描述,這是從其他實驗室帶來了新的細胞的特點是污染的主要來源。因此,有必要隔離細胞,并利用它們作任何用途之前檢查支原體污染。
減少氣溶膠的產生
在層流罩或在孵化的細胞操縱和也氣溶膠制成時氣溶膠的人員可以在實驗室中傳送支原體污染。因此,這導致在制造氣溶膠避免活動可有助于防止在細胞培養物的支原體污染。
支原體測試的重要性
其中正在使用或在美國以及歐洲的細胞銀行細胞支原體污染率約為15%至35%。