??植物DNAout（植物*）

【產品名稱】：??植物DNAout（植物*）供應  

【產品規格】：50ul/0.1ml/0.2ml

【產品價格】：詢價（電詢或客服.郵件）

【抗體來源】：rat.Rabbit OR Mouse

【產品用途】：科研實驗，用于免疫組化實驗，WB實驗，相應的標記抗體有HRP標記抗體，FITC標記，BIO等。
【性        狀】： Lyophilized or Liquid
【濃        度】： 1mg/1ml
【亞        型】： IgG

【貯        存】： 貯存于-20℃.

??植物DNAout（植物*）【相關標記】：HRP  Biotin  Gold  RBITC  AP  FITC  Cy3  Cy5  Cy5.5  Cy7 PE  PE-Cy3  PE-CY5  PE-CY5.5  PE-CY7  APC  Alexa Fluor 350   Alexa Fluor 488    Alexa Fluor 555     Alexa Fluor 647

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供應 免疫組化問題解答:
1 染色過強

原因 解決方法
a 抗體濃度過高或孵育時間過長 降低抗體滴度、抗體孵育時間：室溫1小時或4度過夜
b 孵育溫度過高超過37度 一般在室溫20-28度
c DAB顯色時間過長或濃度過高 顯色時間不超過5-12分鐘，以顯微鏡下觀察為準
2 非特異性背景染色

原因 解決方法
a 操作過程中沖洗不充分 每步沖洗3次每次5分鐘
b 組織中含過氧化物酶未阻斷 可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時間延長
c 組織中含內原性* 正常非免疫動物血清再封閉
d 血清蛋白封閉不充分 延長血清蛋白封閉時間

3 染色弱

原因 解決方法
a 抗體濃度過低、孵育時間過短 提高抗體濃度、孵育時間不能少 于60分鐘
b 試劑超過有效使用時間 應更換試劑
c 操作中添加試劑時緩沖液未瀝干 每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液
使試劑稀釋 （應防止切片干燥）
d 室溫太低 低于15度 要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4 度冰箱過夜
e 蛋白封閉過度 封閉不要超過12分鐘

4 染色陰性

原因 解決方法
a 操作步驟錯誤 應重試 設陽性對照
b 組織中無抗原 設陽性對照以驗證試驗結果
c 一抗與二抗種屬連接錯誤 仔細確定一抗二抗種屬無誤。
 

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                         *組織固定的注意事項*

武漢友聯特生物技術有限公司實驗室提供注意事項：如何組織固定。

1. 固定液的量     
   固定組織時必須有足夠的固定液，一般為組織塊體積的10~15倍。固定用的容器必須足夠大，組織材料不要太多，避免組織中的水分滲出而影響固定液的濃度。
 

2.固定的組織必須新鮮      
   組織取材后應立即固定。特別是在夏季，標本不及時固定，組織易收縮變形，并發生自溶現象。一般組織在離體30分鐘內固定。
 

3.組織塊的體積      
   組織塊的體積宜小而薄，一般用于免疫組化的組織大小宜為1.0cmX1.0cmX0.2cm。組織太大，內部得不到充分固定，導致組織結構破壞，給切片帶來一定的困難，還增加非特異染色，同時浪費試劑。
 

4.固定時間         
   固定時間要視組織塊大小及固定液的種類、濃度、溫度而定。組織塊越大，固定時間越長；反之，組織塊越小，固定時間越短。固定液的穿透力與濃度成正比，固定的時間與溫度成反比?？傊?，固定的時間應根據條件而定。
 

5. 組織固定后的沖洗        
    組織固定后，因固定液滲到組織中，所以必須*沖洗，除去固定液，否則會影響下一步的脫水。特別對于長時間固定的標本應用流水沖洗，盡可能減少色素沉著。對于混合固定液固定的組織，更要及時沖洗，否則將影響免疫組化切片的質量。