上海邦景實業有限公司

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    人肺鱗癌細胞:NCI-H2170 細胞株類
    人肺鱗癌細胞:NCI-H2170 細胞株類
    參考價 面議
    具體成交價以合同協議為準
    • 型號
    • 品牌 其他品牌
    • 廠商性質 經銷商
    • 所在地 上海市

    更新時間:2023-02-13 09:11:41瀏覽次數:264

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    【簡單介紹】
    貨號  BJ-X96712
    人肺鱗癌細胞:NCI-H2170公司的各類產品:間充質干細胞軟骨細胞分化生長因子5mL EGY48 酵母感受態細胞10×100μL
    間充質干細胞生長因子5mL EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白級10mL
    間充質干細胞生長因子 - 無血淸5mL EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白級10mL
    間充質干細胞脂防細胞分化生長因子5mL EcoR I-Not I-BamH I 接頭1nmo

    商品介紹:
    名稱   NCI-H2170 (人肺鱗癌細胞)
    別稱 H2170; H-2170; NCIH2170

    年齡(性別)

    組織來源

    生長特性 貼壁細胞

    細胞形態 上皮細胞樣

    背景描述 NCI-H2170細胞1989年建系,源自一位患有肺鱗狀細胞癌的男性,該患者不吸煙。

    生物安全等級 1

    生長培養基 RPMI-164010% FBS1% P/S

    推薦傳代比例 1:3-1:4

    推薦換液頻率 2~3/

    凍存條件

    凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

    溫度:液氮

    培養條件

    氣相:空氣,95%;CO25%

    溫度:37

    保藏機構 ATCC; CRL-5928

    86.jpg

    產品名稱

    規格

    分類

    貨號

    人肺鱗癌細胞:NCI-H2170

    1×10?cells/T25培養瓶

    細胞系

    BJ-X96712

    實驗要點及說明:
    1
    .本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
    2
    .所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
    3
    .蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
    4
    .如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
    5
    .如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

    實驗報告:          

    一、分離與培養:

    1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1%   I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

    3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

    4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5CO2 培養箱中培養;

    5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

     

    二、免疫熒光鑒定:

    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1Triton   X-100透膜15min

    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

     

    細胞培養的優點:

    1.研究的對象是活細胞
    在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
    2.
    研究條件可以人為控制
    pH
    、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
    3.
    研究的樣本可以達到比較均一性
    通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
    4.
    研究內容便于觀察、檢測和記錄
    采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
    記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
    5.
    研究的范圍比較廣泛
    應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
    適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
    6.
    研究的費用相對較經濟
    可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
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    DNA 電泳分子量標準 (3)pBR322/BstN I50   葡萄球菌 RNAout50

    DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hae 50   平滑肌細胞生長因子5mL

    DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hinc 50   平滑肌細胞生長因子 ( 不含血清 )5mL

    Southern 專用 DNA Marker(  )20   嘌呤干粉25mg
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