上海邦景實業有限公司
主營產品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |
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參考價 | 面議 |
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- 品牌 其他品牌
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- 所在地 上海市
更新時間:2023-02-13 09:11:41瀏覽次數:264
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商品介紹:
名稱 NCI-H2170 (人肺鱗癌細胞)
別稱 H2170; H-2170; NCIH2170
年齡(性別) 男
組織來源 肺
生長特性 貼壁細胞
細胞形態 上皮細胞樣
背景描述 NCI-H2170細胞1989年建系,源自一位患有肺鱗狀細胞癌的男性,該患者不吸煙。
生物安全等級 1
生長培養基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
保藏機構 ATCC; CRL-5928
產品名稱 | 規格 | 分類 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養瓶 | 細胞系 | BJ-X96712 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
| 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
DNA 電泳分子量標準 (3)λ/EcoR I+ Hind III50 次 氣相 RNase 清除劑120mL
DNA 電泳分子量標準 (3)pBR322/BstN I50 次 葡萄球菌 RNAout50 次
DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hae Ⅲ50 次 平滑肌細胞生長因子5mL
DNA 電泳分子量標準 (3)φX174 DNA/Hinc Ⅱ50 次 平滑肌細胞生長因子 ( 不含血清 )5mL
Southern 專用 DNA Marker( )20 次 嘌呤干粉25mg
甲型流感H3N2 HA elisa檢測試劑盒免費代測
海獅elisa檢測試劑盒
海獅孕激素/孕酮(PROG)elisa檢測試劑盒
海獅三碘甲狀腺原(T3)elisa檢測試劑盒
海獅(Cortisol)elisa檢測試劑盒免費代測
人肺鱗癌細胞:NCI-H2170大鼠α-骨膠原交聯(αCTx)elisa檢測試劑盒
大鼠α肌動蛋白(α Actin)elisa分析檢測試劑盒
大鼠α肌動蛋白(α Actin)elisa檢測試劑盒
大鼠α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)elisa分析檢測試劑盒
大鼠α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)elisa檢測試劑盒
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