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產品型號
品 牌
廠商性質生產商
所 在 地上海市
聯系方式:周經理查看聯系方式
更新時間:2018-06-15 12:03:15瀏覽次數:520次
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LBA4404農桿菌LBA4404菌株為Ach5型背景,核基因中含有篩選標簽—利福平抗性基因rif,為了便于轉化操作,此菌株攜帶一無自身轉運功能的章魚堿型Ti質粒pAL4404,此質粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件,pAL4404質粒自身的T-DNA轉移功能被破壞,但可以幫助轉入的雙元載體T-DNA順利轉移)。pAL4404型Ti質粒含有篩選標簽:strep,賦予L
LBA4404農桿菌
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LBA4404菌株為Ach5型背景,核基因中含有篩選標簽—利福平抗性基因rif,為了便于轉化操作,此菌株攜帶一無自身轉運功能的章魚堿型Ti質粒pAL4404,此質粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件,pAL4404質粒自身的T-DNA轉移功能被破壞,但可以幫助轉入的雙元載體T-DNA順利轉移)。pAL4404型Ti質粒含有篩選標簽:strep,賦予LBA4404菌株鏈霉素抗性。這個菌種多用于煙草轉化,卻很少用于擬南芥。RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。實驗步驟:1、RNA的提取;2、反轉錄合成cDNA;3、PCR擴增;4、產物的電泳和結果的測定。RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。相關產品列表:
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