上海雅吉生物科技有限公司

    主營產品: 培養原代細胞,細胞系價格,耐藥細胞株,實時熒光pcr試劑盒

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    您現在的位置: 上海雅吉生物科技有限公司>>細胞培養>>細胞株>> EOMA小鼠血管內皮瘤細胞

    公司信息

    人:
    高杰
    話:
    021-34661276
    機:
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    真:
    021-34661275
    址:
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    EOMA小鼠血管內皮瘤細胞
    EOMA小鼠血管內皮瘤細胞
    參考價 87
    訂貨量 1
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    • 型號
    • 品牌
    • 廠商性質 生產商
    • 所在地 上海市

    更新時間:2019-06-05 09:54:12瀏覽次數:161

    聯系我們時請說明是環保在線上看到的信息,謝謝!

    【簡單介紹】
    EOMA小鼠血管內皮瘤細胞經過形態學等檢測,保證細胞純度在90%以上;同時也需經過微生物檢測。來源于美國ATCC、DSMZ、ECACC、上海生化細胞所、中國科學院典型培養物保藏委員會等,經過嚴格質量控制,100%進口來源,100%保證5代以內,活力95%以上,保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細菌。免費贈送STR鑒定報告,一切為科研!

    培養條件:DMEM+10% FBS;37℃,5% CO2
    生長狀態:貼壁
    EOMA小鼠血管內皮瘤細胞步驟
    一.培養基及培養凍存條件準備:
    1) 準備培養基;北美胎牛血清,10%;雙抗1%。
    2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
    二.細胞處理:
    1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
    2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
    1. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
    2. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
    3. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。 下面T25瓶為例;
    1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
    2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
    3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
    EOMA小鼠血管內皮瘤細胞注意事項:
    1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們。
    2. 先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置數小時(4h左右),穩定細胞狀態,切忌在溫箱內靜置過夜。
    3. 靜置后鏡檢,拍照,記錄細胞狀態。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。
    4. 貼壁細胞:若細胞密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,收集細胞瓶內的培養基,留8ml繼續培養至80%左右再傳代,瓶蓋可稍微擰松。
    5. 細胞瓶內的培養基含血清和雙抗,可收集后4℃保存備用,可補加2%血清。剛開始傳代時建議一半用細胞瓶內的培養基,一半用客戶自備的培養基,使細胞逐漸適應培養條件,以免因不適應而造成生長狀態不佳。
    6. 細胞胰酶消化液建議使用PBS配制,
    7. 因為細胞培養過程外因太多,所以我們的售后保障期為一周,超過一周的細胞我們會酌情處理,但不提供免費更換服務。 細胞運輸和保存:可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。



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