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細胞治療之無血清細胞凍存
閱讀:337 發布時間:2019-6-11在細胞培養中,細胞凍存是關鍵環節之一,尤其在細胞治療、細胞存儲中對細胞凍存更有特殊要求,下面就根據降溫速度以及凍存液組分對細胞凍存做詳細介紹。
根據降溫速度區分,細胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降溫法)與快速凍存(非程序降溫法)。
程序降溫凍存技術要點是慢凍,標準的凍存程序為降溫速率-1~-2/℃ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5 ℃~-10℃/min。之前,常用的傳統方法是將凍存管置于4 ℃30分鐘--->-20 ℃ 60分鐘--->-80 ℃過夜--->液氮罐。不過,由于步驟較多,間隔時間又長,很容易遺忘。之后,人們也開始使用程序降溫盒。將凍存管放入程序降溫盒中,再將程序降溫盒放入-80 ℃冰箱。以1 ℃/min的速度進行降溫。
快速凍存即不需要經過梯度降溫,直接將細胞放入-80 ℃冰箱24h,后轉入液氮長期凍存。快速凍存簡化了凍存步驟,同時不需要使用梯度凍存盒。
不同的凍存方法代表了不同的凍存體系,程序降溫法使用的凍存液主要配方為培養基、血清、DMSO。血清大多采用牛源,同時血清中未知成分和病毒等感染物質會給凍存帶來影響與風險,該方法科研上廣泛使用,并延續至今,但是顯然已經不能適應現今細胞治療的應用場景。
隨著細胞治療以及細胞儲存產業發展,細胞凍存也面臨從科研應用走向產業轉化。凍存要求發生改變,因為凍存細胞要進行臨床應用,所以凍存液成分由原來血清變為無血清,無動物源成分,凍存液中使用的所有原料均應符合臨床或藥物需求。隨著細胞凍存數量增加,凍存流程簡化也成為必然趨勢,因此無血清非程序降溫凍存液應運而生。
目前針對細胞治療領域,AppliedCell推出一款即用型的無血清細胞凍存液,這款產品是細胞凍存研究的革新,主要具有幾大特點,凍存液無血清成分、無需配制直接使用、無需程序降溫盒、不需分步降溫、即用型細胞凍存液。該款凍存液適用于臍帶、脂肪、骨髓等間充質干細胞,免疫細胞以及大多數細胞系凍存。同時該款所有成分均使用藥用級原料配制而成,*適應細胞儲存,細胞治療以及科學研究等不同場景使用。