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伊萊博生物科技（上海）有限公司
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平板細胞克隆實驗
| 參考價 | ￥ 350 |
| 訂貨量 | 6件 |
具體成交價以合同協議為準
- 型號
- 品牌 其他品牌
- 廠商性質 其他
- 所在地 上海市
更新時間：2024-03-14 15:39:33瀏覽次數：419
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克隆形成試驗是測定細胞增殖能力的有效方法之一，貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆，而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞。細胞克隆形成率表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數量，可以反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。
實驗步驟：
1.取對數生長期的各組細胞，分別用0.25%ydbm消化并吹打成單個細胞，并把細胞懸浮在10%胎牛血清的DMEM培養液中備用。
2.將細胞懸液作梯度倍數稀釋，每組細胞分別以每皿50、100、200個細胞的梯度密度分別接種含10mL 37℃預溫培養液的皿中，并輕輕轉動，使細胞分散均勻。置37℃ 5%CO2及飽和濕度的細胞培養箱中培養2——3周。
3.經常觀察，當培養皿中出現肉眼可見的克隆時，終止培養。棄去上清液，用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定細胞5mL固定15分鐘。然后去固定液，加適量GIMSA應用染色液染10——30分鐘，然后用流水緩慢洗去染色液，空氣干燥。
4. 將平皿倒置并疊加一張帶網格的透明膠片，用肉眼直接計數克隆，或在顯微鏡（低倍鏡）計數大于10個細胞的克隆數。最后計算克隆形成率。
