原子分光光度計

原子分光光度計，測量更為準確，靈敏度高；b 吸光光度法只采用一個單色器，而熒光分析儀器有兩個單色器，分別用于獲得單色性較好的激發光和分出某一波長的熒光，消除其它雜散光的干擾，其儀器的準確度、靈敏度也更高；c 熒光測量中的激發光源比吸收光度法的光源有更大的發射強度，光源更穩定，因此其儀器的準確度、靈敏度也就更高，綜上所述，熒光分光光度計熒光法的檢出限優于吸光光度法。

原子分光光度計

事先要選擇對應的系數。如：1OD 的吸光值分別相當于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。測試后的吸光值經過上述系數的換算，從而得出相應的樣品濃度。測試前，選擇正確的程序，輸入原液和稀釋液的體積，爾后測試空白液和樣品液。然而，實驗并非一帆風順。讀數不穩定可能是實驗者頭痛的問題。靈敏度越高的儀器，表現出的吸光值漂移越大。

光度計的設計原理和工作原理，允許吸光值在一定范圍內變化，即儀器有一定的準確度和精確度。如Eppendorf Biophotometer的準確度≤1.0%（1A）。這樣多次測試的結果在均值1.0%左右之間變動，都是正常的。另外，還需考慮核酸本身物化性質和溶解核酸的緩沖液的pH值，離子濃度等：在測試時，離子濃度太高，也會導致讀數漂移如TE，可大大穩定讀數。樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素：由于樣品中不可避免存在一些細小的顆粒，尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在干擾測試效果。為了大程度減少顆粒對測試結果的影響，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值好在0.1-1.5A。在此范圍內混合液不能存在氣泡，空白液無懸浮物，否則讀數漂移劇烈；必須使用相同的比色杯測試空白液和樣品，否則濃度差異太大；換算系數和樣品濃度單位選擇一致；不能采用窗口磨損的比色杯；樣品的體積必須達到比色杯要求的小體積等多個操作事項。