傅經理
脂蛋白酯酶(LPL)&肝脂酶(HL)試劑盒產品簡介:
脂蛋白酯酶(Lipoproteinlipase,LPL)是甘油三酯降解的降速酶,可催化甘油三脂水解為脂肪酸和單酸甘油酯,主要在肝臟實質細胞中合成,在脂質代謝和轉運中發揮重要作用。脂蛋白酯酶水解 4-硝基苯棕櫚酸酯產生 4-硝基苯,在 400nm 有特征吸收峰。
脂蛋白酯酶(LPL)&肝脂酶(HL)試劑盒試驗中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計、低溫臺式離心機、水浴鍋、1mL 玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、EP 管、冰、丙酮和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提取:
1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104 個):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);10000g 4℃離心 10min, 取上清,置冰上待測。
2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入
1mL 試劑一),進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)樣品:直接檢測。
二、測定步驟:
1、分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 400nm,蒸餾水調零。
2、將 5µmol/mL 標準液用試劑一稀釋 16 倍至 0.3125 µmol/mL 的標準溶液備用。