Cell Meter細胞內熒光法過氧化氫檢測試劑盒 返回列表頁

樣品實驗方案

簡要概述

1.在生長培養基中制備細胞
2.使用OxiVision Green過氧化物染色細胞
3.用測試化合物處理細胞
4.用流式細胞儀FITC通道監測熒光強度（Ex / Em = 490/530 nm）

溶液制備

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環。
1. OxiVision 綠色過氧化物傳感器原液：
將100μLDMSO（組分B）加入到OxiVision 綠色過氧化物（組分A）的小瓶中，并充分混合。 注意：1μL重組的OxiVision 綠色過氧化物儲備溶液適用于0.5 mL細胞。 應立即使用原液,避光。

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樣品分析

1.使用OxiVision 綠色過氧化物傳感器儲備溶液在培養基或37°C所需緩沖液中染色細胞30分鐘，避光。

2.用測試化合物在培養基或37℃的所需緩沖液中處理細胞一段所需的時間。對于對照樣品（未處理的細胞），加入相應量的化合物緩沖液。注意：建議在培養基中處理細胞。然而，如果測試的化合物對血清敏感，則可以在前吸出生長培養基和血清因子。在抽吸后，將細胞重懸于1X Hank鹽溶液和20mM Hepes緩沖液（HHBS）或您選擇的緩沖液中。或者，可以在無血清培養基中處理細胞。注意：我們用培養基中的100μM過氧化氫在37°C處理Jurkat細胞90分鐘以誘導過氧化氫。詳細信息請參見圖1。

3.用測試化合物在37℃處理細胞一段所需的時間。取出處理溶液，然后用OxiVision 綠色過氧化物傳感器儲備液在全培養基或37°C所需的緩沖液中染色細胞一段所需的時間。

4.使用流式細胞儀監測FITC通道（Ex / Em = 490 / 530nm）的熒光強度。