Amplite 熒光法L-抗壞血酸檢測試劑盒 返回列表頁

Amplite 熒光法L-抗壞血酸檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于檢測抗壞血酸的試劑盒，L-抗壞血酸是細胞分裂，生長和防御中植物和動物的關鍵代謝物。抗壞血酸由大多數哺乳動物物種的肝臟中的葡萄糖產生。對于人類而言，抗壞血酸必須從食物中獲得才能存活，可能導致死亡?？寡趸瘎┛寡趸瘎┛梢越档突及┌Y和心血管疾病等慢性疾病的風險。在食品工業中，抗壞血酸及其鈉，鉀和鈣鹽通常用作抗氧化食品添加劑。 AAT Bioquest的Amplite 熒光抗壞血酸檢測試劑盒提供靈敏的熒光檢測，用于定量生物樣品中的總抗壞血酸和脫氫抗壞血酸（DHA）與抗壞血酸的比例。它利用將抗壞血酸氧化成DHA的酶反應，可以通過熒光酶標儀用Ascorbrite Blue檢測。該測定可以檢測樣品中1uM的總抗壞血酸。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優質的Amplite 熒光法L-抗壞血酸檢測試劑盒。

樣品實驗方案

簡要概述

1.用稀釋的抗壞血酸標準品（50μL）制備測試樣品
2.加入等體積的工作溶液（50μL）
3.在室溫下孵育30分鐘至1小時
4.監測Ex / Em = 340 / 430nm處的熒光強度

溶液配制

1.儲存溶液配制

所有未使用的儲備溶液應分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。 避免反復凍融循環。
1.1Ascorbrite Blue原液（200X）：
將50μLDMSO（組分E）加入Ascorbrite Blue（組分A）中以制備200X Ascorbrite Blue原液。

1.2抗壞血酸標準溶液（100 mM）：
將200μLddH2O加入抗壞血酸標準小瓶（組分D）中以制備100mM抗壞血酸標準溶液。

2.標準溶液配制

2.1抗壞血酸標準溶液
將10μL100mM抗壞血酸加入990μL測定緩沖液中，得到1000μM抗壞血酸溶液（AA7）。 然后取1000μM抗壞血酸標準溶液，進行1：3連續稀釋，得到連續稀釋的抗壞血酸標準品（AA1 - AA6）。 注意：抗壞血酸水溶液不穩定，會氧化成DHA。

3.工作溶液配制

3.1總AA測定
將5mL測定緩沖液（組分C）加入一瓶酶混合物（組分B）中。 然后將25uL Ascorbrite Blue原液（200X）加入同一瓶中。 好好混合。

3.2DHA測定
在合適的容器中，加入5mL含有25uL AscorbriteTM Blue原液（200X）的測定緩沖液（組分C）。 好好混合。 注意：或者，可以通過在一個酶混合瓶（組分B）中加入100μLddH2O制備酶原液，制備50X酶原液，并按比例用于總AA測定（例如，1mL總AA測定工作溶液） ，將20μL50X酶原液和5μL200XAscorbrite Blue原液添加到1 mL分析緩沖液中。 注意：溶液及時使用，避免直接暴露在光線下。