張經理
當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>trFluor™ 染料和試劑盒>>檢測試劑盒>> 13802Amplite 熒光法丙an酸轉氨酶檢測試劑盒
Amplite 熒光法丙an酸轉氨酶檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于檢測丙an酸的試劑盒,丙an酸氨基轉移酶(ALT),也稱為血清谷an酸丙酮酸轉氨酶(GPT),是轉移酶家族的成員。它催化丙an酸和谷an酸之間α-氨基的可逆轉移,是氨基酸代謝中的重要酶。 ALT主要存在于肝臟中,少量存在于心臟,肌肉和腎臟中。在健康受試者中,血清ALT水平低。然而,當細胞受損時,例如急性和慢性肝炎,阻塞性黃疸,肝癌,心肌梗塞,ALT可能會滲入血流并且ALT水平顯著升高。因此,測定血清ALT水平具有重要的臨床和診斷意義。 Amplite 熒光丙an酸氨基轉移酶檢測試劑盒為各種生物樣品中的ALT測量提供了一種快速而靈敏的方法。 ALT催化丙an酸和α-酮戊二酸與丙酮酸和谷an酸的反應。通過酶偶聯反應循環產生紅色熒光產物來測量產物谷an酸。可以通過熒光酶標儀在Ex / Em = 530-570nm / 590-600nm(佳Ex / Em = 540nm / 590nm)下讀取信號。使用Amplite 熒光丙an酸氨基轉移酶檢測試劑盒,在100μL反應體積中檢測到低至4 mU / mL的ALT。該測定是穩健的,并且可以容易地適用于各種各樣的應用。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供優質的Amplite 熒光法丙an酸轉氨酶檢測試劑盒。
樣品實驗方案
簡要概述
1.準備ALT工作溶液(50 µL)
2.加入ALT標準液或測試樣品(50 µL)
3.在37°C下孵育30分鐘至60分鐘
4.監測Ex / Em = 540/590 nm時的熒光增加
溶液制備
1.儲備溶液
所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣,并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復凍融循環。
1.1 ALT標準溶液:
將100 µL DPBS加到ALT陽性對照(成分D)的小瓶中,制成100 U / mL ALT儲備液。
2.標準溶液
ALT標準
將10 µL 100 U / mL ALT標準溶液加到含0.1%BSA的990 µL DPBS緩沖液中,以生成1000 mU / mL ALT標準溶液(ALT7)。 取1000 mU / mL ALT標準溶液并進行1:3連續稀釋,以得到ALT標準品(ALT6-ALT1)的連續稀釋液。
3.工作溶液
3.1 NAD解決方案(100X):
將100 µL ddH2O加入NAD小瓶(組分C)。
3.2 ALT酶混合物溶液:
將10 mL ALT分析緩沖液(組分B)添加到ALT酶混合物(組分A)瓶中,并充分混合。
3.3 ALT工作溶液:
將整個小瓶100X NAD溶液(從1)添加到ALT酶混合物溶液(從2)中,以得到ALT工作溶液。
注意:此ALT工作溶液足以容納兩個96孔板。 它在室溫下不穩定,應在2小時內及時使用,并避免暴露在光線下?;蛘?,可以通過將200μLH2O加入組分A的瓶子中制成50倍的ALT酶混合物儲備溶液,然后通過將儲備溶液與測定緩沖液(組分B)和100x NAD溶液按比例混合來制備ALT工作溶液。
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