張經理
當前位置:西安百螢生物科技有限公司>>trFluor™ 染料和試劑盒>>檢測試劑盒>> 20305Amplite 熒光法cADP-核糖檢測試劑盒
Amplite 熒光法cADP-核糖檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產的用于檢測核糖的試劑盒,cADP-核糖(cADPR)是衍生自NAD +的新型Ca2 +信使。 ADP-核糖基環化酶(ADPRC)催化從NAD +合成cADPR,但是在高濃度*存在下,該反應可以逆轉,從化學計量上從cADPR產生NAD +。 可以使用我們新開發的NAD傳感器Quest Fluor NAD試劑檢測生成的NAD +。 這使得可以在低nM范圍內監視組織和細胞培養物中的cADPR。 使用Quest Fluor NAD試劑進行的NAD +檢測對NAD +具有特異性,對NADH無反應。 熒光信號可以容易地檢測到。 該測定可以在方便的96孔或384孔微量滴定板中進行。百螢生物為您提供優質的Amplite 熒光法cADP-核糖檢測試劑盒.
樣品實驗方案
簡要概述
1.準備并添加cADPR標準和/或測試樣品(50 µL)
2.準備并添加ADRPC工作溶液(50 µL)
3.在室溫下孵育1小時
4.添加40 µL Quest Fluor NAD探針
5.添加40 µL測定溶液
6.在室溫下孵育20分鐘
7.添加30 µL增強劑溶液
8.在室溫下孵育20分鐘
9.在Ex / Em = 420/480 nm處監控熒光強度
溶液制備
1.儲備溶液
所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣,并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復凍融循環。
cADPR標準儲備溶液(5 mM):
將10 µL ddH2O加入cADPR標準樣品瓶(組分F)中,并充分混合。 注意:未使用的cADPR儲備溶液應以-20℃一次等份保存。
2.標準溶液
cADPR標準
注意:在測定溶液I(組分C)中準備cADPR系列稀釋液。
3.工作溶液
ADPRC工作溶液:
將50 µL ddH2O加入ADPRC酶混合物(組分B)的小瓶中,并充分混合。 將全部內容物轉移到5毫升測定溶液I(組分C)中,并充分混合。 注意:ADPRC工作溶液不穩定,請立即使用。
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