Cell Meter 磷脂酰*凋亡檢測試劑盒 返回列表頁

我們的Cell Meter 磷脂酰*凋亡檢測試劑盒 是一套用于監測細胞活性的試劑盒。有多種參數可用于監測細胞活力。Cell Meter 磷脂酰*凋亡檢測試劑盒 旨在通過測量磷脂酰絲an酸（PS）的轉運來監測細胞凋亡。在細胞凋亡中，PS轉移到質膜的外部小葉。磷脂酰絲an酸在細胞表面的出現是細胞凋亡的初始/中間階段的通用指標，可以在觀察形態變化之前進行檢測。該特定試劑盒旨在通過測量磷脂酰絲an酸（PS）的轉運來監測細胞凋亡。該試劑盒使用我們專有的基于熒光小分子的Apopxin™PS探針，該探針以比膜聯蛋白V（Kd<10 nM）高得多的親和力特異性結合PS。與膜PS結合后具有藍色熒光。它可以以酶標儀，顯微鏡和流式細胞儀的形式使用，而大多數其他商業凋亡檢測試劑盒只能與顯微鏡或流式細胞儀平臺一起使用。

樣品實驗方案

簡要概述

1.用測試化合物制備細胞（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板）
2.加入等量的Apopxin™Violet 450工作溶液
3.在室溫下孵育1小時
4.觀察Ex / Em = 405/450 nm（截止= 420 nm）的熒光強度（底部讀取模式）或使用裝有紫羅蘭色濾光片的熒光顯微鏡

溶液配制

工作溶液配制

將10μL100X Apopxin™紫羅蘭色450（組分A）添加到1 mL的測定緩沖液（組分B）中，并充分混合以制成Apopxin™紫羅蘭色450工作溶液。

操作步驟

1.通過向PBS或所需的緩沖液中加入10X /孔（96孔板）或2.5 µL /孔（384孔板）的10X測試化合物儲備溶液來處理細胞。對于空白孔（不含細胞的培養基），添加相同量的化合物緩沖液。

2.將細胞板在5％CO2、37°C的培養箱中孵育所需的時間（對于用星形孢菌素處理的Jurkat細胞需要4-6小時）以誘導凋亡。注意：由于在405 nm激發時，從380至490 nm的寬發射光譜，某些化合物（例如喜shu堿）可能會產生假陽性反應。

3.在每個孔中添加100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Apopxin™Violet 450工作溶液。

4.在避光條件下，于室溫下孵育細胞板至少1小時。

5.以800 rpm的速度離心細胞板（特別是非粘附細胞）2分鐘（制動）。

6.使用熒光酶標儀（底部讀取模式）在Ex / Em = 405/450 nm（截止= 420 nm）或使用帶有紫色濾光片的熒光顯微鏡對圖像池進行熒光強度監測。