綠色熒光示蹤探針 CytoTrace Ultra Green 返回列表頁

實驗方案

簡要概述

1. 準備實驗細胞

2. 溶液配制

3. 在室溫或37℃下將染料與細胞一起孵育15至30分鐘

4. 去除染料中的工作溶液

5. 使用流式細胞儀分析（Ex / Em = 490/520 nm-FITC濾波器）

溶液配制

儲備溶液配制

CytoTrace Ultra Green原液（2-10 mM）：添加適量的DMSO充分混合以制成CytoTrace Ultra Green原液（2-10 mM）。注意：儲備溶液應立即使用；所有剩余的溶液應等分，并在<-20 o C下冷凍。避免重復凍融循環，并避光。

工作溶液配制

CytoTrace Ultra Green工作溶液：通過用Hanks和20 mM Hepes緩沖液（HHBS）或自備的pH=7的緩沖液稀釋DMSO儲備液，制備0.5至5 µM的染料工作液，并離心。注意：在某些細胞類型，可能需要較低的濃度才能染色細胞。我們建議在進行實驗之前針對每種細胞類型進行測試以獲得佳濃度使實驗更順利。

操作步驟

1. 用測試化合物處理細胞。
   
   

2. 離心細胞以獲得每管2-10×10 5個細胞。
   
   

3. 將細胞重懸于500 µL CytoTrace Ultra Green工作溶液中。
   
   

4. 在室溫或37°C下，將細胞與染料溶液孵育15至30分鐘，避光。
   
   

5. 從細胞中除去染料工作溶液；可選：4％甲醛固定細胞。
   
   

6. 用HHBS或自備的緩沖液洗滌細胞一次。
   
   

7. 將細胞重懸于500 µL預熱的HHBS或培養基中，每管可得到2-10×10 5個細胞。
   
   

8. 使用流式細胞儀或帶有FITC濾波片組的熒光顯微鏡檢測Ex / Em = 490/520 nm處的熒光變化。