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更新時間:2022-09-06 17:49:16瀏覽次數:181次
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站在共聚焦成像與雙光子顯微術的上尼康的A1RMP是一款擁有獨到技術的雙光子顯微成像系統,不僅具備高分辨率檢流計式掃描器(galvanometerscanner),而且還配備了高速共振式掃描器(resonantscanner)
尼康的A1R MP 是一款擁有獨到技術的雙光子顯微成像系統,不僅具備高分辨率檢流計式掃描器(galvanometer scanner),而且還配備了高速共振式掃描器(resonant scanner)。掃描速率在512 X 512像素水平下高達到30幀/秒;在帶狀掃描模式下可達420幀/秒。新型四通道NDD探測器(non-descanned detectors)具有更高的探測效率、更低的暗電流以及更寬的響應光譜,可以對譜線相近的熒光探針進行實時光譜拆分與識別,并大大提高熒光圖像的對比度。此功能對于雙光子顯微鏡非常重要,因為在雙光子成像時一般只能使用單一的激發波長,往往不可避免地造成自發熒光以及發射光譜的重疊。高達420幀/秒成像速率的共振掃描鏡 尼康所*的共振掃描技術,較之于非共振的普通掃描器,大幅提高了寬視場掃描速率,達到了點掃描成像的快速率420幀/秒(512X32)。同時在512X512分辨率下亦可以實現30pfs的成像速度(FOV:18mm)。利用多光子顯微術專用的NDD探測器,可以對非常厚的標本進行深部快速成像。尼康的光學同步(optical pixel clock)技術充分保證了超高速圖像的均勻性和穩定性。
A1R MP+超高速共振掃描頭發出的飛秒脈沖紅外激光激發生物體血管內的血細胞,使用3個獨立的顏色通道,以30fps速度拍攝的三張連續熒光圖像中捕捉到血細胞運動。箭頭表示示蹤的白細胞細胞核的移動情況。三個熒光探針同時被激發,為細胞核 (藍色)、血管內皮細胞(綠色)和血漿(紅色)成像。長波超快激光與超高速共振掃描頭結合使用,能有效減小圖像失真,可實現生物分子的時間分辨多光子成像。圖像分辨率512*512像素,圖像采集速度:每秒30幀,物鏡:水浸物鏡60×合作拍攝者 Satoshi Nishimura 博士,PRESTO,東京大學,TSBMI,心血管醫學系,日本科學技術振興機構提供。Japan Science and Technology Agency提供。 高靈敏度NDD深部成像 尼康新開發的多光子四通道NDD探測器能夠有效地進行標本深部的顯微成像。較普通探測器而言,NDD的感光元件面積更大,靈敏度更高,并安裝于距離物鏡后出光口(back aperture)最近的地方. 該配置有效地提高了對散射熒光的探測效率,具有更高的信噪比(S/N),對諸如活體組織等較厚的標本的拍攝,具有比普通共聚焦顯微鏡更為清晰穩定的圖像質量。 四通道反射NDD 四通道透射NDD
活體小鼠大腦皮層深層成像用開顱法研究H-line5周齡小鼠的大腦皮層。可從底層到表層看到第五層表達EYFP的椎體神經元的完整樹突。此外還研究了更深區域白質中的熒光信號。左:三維重建圖像 右:z軸疊加圖像 上圖:距離表層25μm深度部位的第五層椎體細胞的表層樹突 中圖:第五層椎體細胞的基底樹突距離表層625μm 下圖:白質中的熒光激發波長:930nm 物鏡:CFI75復消色物鏡25×W MP(NA1.10WD2.0)合作拍攝者:Tomomi Nemoto博士,北海道大學電子科學研究所;Shigenori Nonaka博士,國家基礎生物學研究所;Takeshi Lmamura博士,愛媛大學醫學研究生院。小鼠大腦皮層多色成像使用950nm紅外激光對麻醉YFP-H小鼠進行成像,在3個通道中同時分別獲取兩個熒光信號和二次諧波產生(SHG)信號。青色:硬腦膜的SHG信號黃色:EYFP標記的皮層第五層椎體神經元紅色:SRB標記的血管合作拍攝者:Ryosuke Kawakami博士,Terumasa博士,Tomomi Nemoto博士,北海道大學電子科學研究所。
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