DMEM-高糖液體無丙酮酸鈉、HEPES C0162-819 500ml
產品說明：
DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）高糖培養基是廣泛用于哺乳動物細胞培養的一種基礎培養基。其高糖版本含有較高的葡萄糖濃度，通常適用于對糖需求較高的細胞類型，比如某些類型的癌細胞或是快速增殖的細胞。
以下是使用DMEM高糖培養基的基本步驟：
準備培養基
1. 配制培養基：
- 如果使用的是干粉形式的培養基，首先制備新鮮的三蒸水或超純水。
- 根據所需的最終體積稱量適量的干粉培養基，并將其溶解在大約半量的水中。
- 溶解完畢后，補足剩余的水量至最終體積。
- 攪拌直至溶解，確保沒有顆粒殘留。
2. 過濾除菌：
- 使用0.22 μm的無菌過濾器過濾培養基，以除去可能存在的微生物。
3. 加熱滅菌（如果適用）：
- 雖然過濾已經可以達到無菌，但有些實驗室可能會選擇高壓滅菌。
- 然而，高壓滅菌可能會破壞培養基中的某些成分，因此不是必需步驟。
4.冷卻：
- 將培養基冷卻至室溫或接近室溫，準備添加其他補充物。
添加補充物
1. 添加血清：
一般添加10%的胎牛血清（FBS），但根據細胞類型和實驗目的，這個比例可能有所不同。
2. 添加抗生素：
- 如雙抗，用于防止細菌污染。
3. 其他補充物：
- 可能需要添加額外的氨基酸、維生素或其他營養補充物，這取決于具體的細胞培養需求。
調節pH值
1.使用pH計：
- 在無菌條件下，使用pH計將培養基的pH值調節到7.2-7.4之間。
- DMEM培養基通常使用碳作為緩沖系統，需要在含有5-10% CO?的環境中維持生理pH值。
使用培養基
1.預熱：
- 在使用前，將培養基預熱至37°C，以匹配細胞培養箱的溫度。
2.無菌操作：
- 在細胞培養的所有步驟中，都應遵循無菌操作原則，以防止污染。
3. 避免凍融循環：
- 一旦配制好的培養基應避免凍融，因為這可能影響其性能。
4. 使用期限：
- 配制的培養基需要在兩周內使用完畢，以保證其質量和效果。
5. 細胞接種：
- 將適當數量的細胞接種到含有DMEM高糖培養基的培養皿或瓶中，按照細胞的生長特性進行后續的培養。
請記得，不同的實驗室和不同的細胞系可能有其特定的培養條件和偏好，因此上述指導原則可能需要根據具體情況作出調整。
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