產品名稱:消化液Trypsin-EDTA0.25%
產品貨號:C0160-711
產品規格:500ML
運輸溫度:-20攝氏度
效 期:12個月
使用Trypsin-EDTA0.25%消化液的基本步驟如下:
1.準備階段:
- 吸去細胞培養瓶中的舊培養基。
- 使用PBS(磷酸鹽緩沖液)、Hank's液或其他無血清的緩沖液清洗細胞一次,以去除殘留的血清和其他可能影響Trypsin-EDTA活性的物質。
2. 消化階段:
- 加入適量的Trypsin-EDTA0.25%消化液,確保液體覆蓋所有細胞。
- 室溫下孵育,時間根據細胞類型而定,一般從幾十秒到幾分鐘不等。消化時間過長可能會損傷細胞。
3. 終止消化:
- 當細胞開始從表面松動時,立即吸去Trypsin-EDTA0.25%消化液。
- 加入含有血清的新鮮培養基,因為血清中的蛋白質能中和Trypsin-EDTA0.25%的活性,終止消化過程。
4. 離心與重懸:
- 將細胞混合物轉移到離心管中,進行低速離心(約1000~2000 g)1分鐘,收集細胞沉淀。
- 去除上清液,使用新鮮的wan全培養基重新懸浮細胞,然后可將細胞分種到新的培養瓶或進行進一步的實驗操作。
注意事項:
- 不同類型的細胞對Trypsin-EDTA0.25%的敏感度不同,消化時間需要根據經驗或文獻指導調整。
- 消化過程中應密切觀察細胞狀態,避免過度消化導致細胞損傷。
- 一些細胞類型可能需要不含EDTA的Trypsin消化液,尤其是用于原代細胞分離時,因為EDTA可能會影響某些細胞的功能或存活率。
- 在處理Trypsin-EDTA0.25%消化液時,要遵循實驗室安全規范,因為Trypsin-EDTA0.25%和EDTA都是潛在的刺激性化學物質。
這些步驟和注意事項適用于大多數細胞系,但在具體操作時,應參考特定產品的說明書以及細胞系的特性來進行適當的調整。