EvaGreen 是一種用于實時定量PCR(qPCR)的DNA結合染料。該染料的諸多優點使它遠勝于SYBR Green I。除了有相似的光譜特性, EvaGreen有三個主要特點使它區別于SYBR Green I。
詳細介紹
20×EvaGreen熒光染料
EvaGreen 是一種用于實時定量PCR(qPCR)的DNA結合染料。該染料的諸多優點使它遠勝于SYBR Green I。除了有相似的光譜特性, EvaGreen有三個主要特點使它區別于SYBR Green I。 1.EvaGreen對PCR的抑制性遠小于SYBR Green I,因此,使用EvaGreen進行的qPCR實驗可以使用快速PCR步驟。 2.EvaGreen在實驗中可以使用較高的濃度,從而獲得遠強于SYBR Green I擴增信號;較高濃度的EvaGreen也消除了“染料重分布"的缺陷,使EvaGreen既可用于多重PCR,也可用于高分辨率(高清晰)熔解曲線分析( HRM );該分析正被越來越多的用于PCR后的基因分型和異源雙鏈分析。由于SYBR Green I 對PCR的抑制性,從而要求其使用濃度必須很低,因此SYBR Green I無法解決由低濃度造成的染料重分布問題,既不能用于多重PCR也不能用于HRM。同時,染料重分布問題也可能影響常規熔解曲線的可靠性,因為低熔點的DNA鏈可能由于這種原因而無法檢測到。 3.EvaGreen 的穩定性好。在正常的儲存、操作和PCR過程中不會被破壞。在緩沖溶液中的染料可以安全的儲存在室溫或冰箱里,也可以反復凍融。與之相反,SYBR Green I不穩定而且降解后對PCR抑制性更強。