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熒光素標記腫瘤壞死因子抗體IgG抗體保存指南
抗體保存得當與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當,大部分抗體活性都可以維持數月甚至數年。本公司抗體保存,同樣也可以應用到其他絕大部分公司的抗體產品!
請謹記!無論何時請按照說明書的保存條件正確保存抗體!
o . 收到抗體后請務必在2000rpm 離心20-30s 后再打開管蓋進行分裝和保存!
質優的抗體使用非常特殊的儲存管,只有在2000rpm 離心20-30s 才能將附著在管壁或蓋內的抗體全部離心下來。即使是在0000rpm 離心也會導致離心不*,導致出現抗體的量不足的現象!
熒光素標記腫瘤壞死因子抗體IgG對于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20 度 or -80 度對
絕大多數抗體來說,保存在-20 度是*足夠了。沒有任何證據顯示保存在-80
度 會有更多的好處!
o .分裝可以zui大程度的降低反復凍融對抗體活性的損害,同時也降低了由于多次
從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
o .分裝的量以一次實驗用完為好,zui少不能少于0ul 每份。因為分裝體積越小,
抗體的濃度越可能會受到蒸發以及管壁吸附的影響
o 復融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4 度,避免再凍起來!
o 抗體工作液應該當天配制當天用完,在4 度 盡量不要超過 天。
o 避免將抗體保存在自動除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是
門上
o . 大部分抗體收到后4 度短暫保存-2 周對抗體活性是沒有影響的。
如果抗體很快(-2 周)會使用,在4 度保存,這是為了避免反復凍融對抗體活性的損害。
如果要保存則是在-20 度 or -80 度。zui關鍵的一點是要根據說明書的方式來正確的保存抗體!
但是,腹水形式的產品請在收到后立即凍起來!因為該類產品含有大量的蛋白酶,在4 度保存會導致抗體的降解!
o .大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要-2 周的時間,所以是在4 度的條件下來完成的。 4 度運輸zui主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸,那么收到時抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運輸過程中避免干冰運輸!
上海谷研生物科技有限公司特殊抗體的保存條件:
. 酶聯抗體:永遠保存在4 度,避免凍起來。否則會導致酶活性的下降或者喪失
2. 偶聯抗體:所有偶聯抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對
光極為敏感,因此在所有的實驗階段也是要避光操作的!
3. IgG3 的同型對照:永遠保存在4 度,避免凍起來。因為如果出現凍融過程,該抗體非常
容易形成多聚體無論是保存還是運輸,避免反復凍融!
反復凍融會導致抗體變性,導致多聚體形成,從而降低抗體的結合能力!
關于加入甘油保存:有些人會加50%的甘油到抗體中來避免反復凍融,甘油在-20 度 會降低冰點。這對很多抗體可能是可行的。但是abcam 僅對非常小的一部分抗體檢測過其在這種條件下的穩定性;而abcam 只對按照條件保存的抗體提供質量保證!加入甘油的溶液不建議在-80 度保存,因為這已經超過了甘油的冰點。如果您要加入甘油來保存抗體的話,請謹慎注意無菌操作,避免污染!
關于蛋白保護劑:
蛋白在高濃度時更不容易降解( mg/ml 或者更高),這就是為什么在抗體中加入BSA 之類作為穩定劑的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來標記的話,則不能加入蛋白穩定劑,因為這些穩定劑會和抗體一起競爭結合標記物。
關于*(sodium azide)的使用:
為了防止微生物污染,*經常被加入到抗體中(終濃度0.02% (w/v))。Abcam 的很多抗體已經含有了0.02%-0.05%的*,在說明書的“Storage buffer”中有標明的。
在下述情況中不能使用*:
• 如果抗體用于染色或處理活細胞,用于體內研究:
*在抵抗微生物的同時,對其它大部分有機物也是有毒的,因為它阻斷了線粒體的
cytochrome electron transport system.
• 要偶聯帶有氨基基團的抗體:
*會干擾任何含有氨基基團的偶聯,因此在進行偶聯之前,應將*去除。偶聯后的抗體可以加入*保存,但是濃度只能是0.0%。對于需要偶聯的抗體,thimerosal
(merthiolate)可以替代*作為保護劑!
注:*的去除方式:
可以通過凝膠電泳或過濾的方式去除!IgG 的分子量是50kDa (IgM 是~ 600kDa); *的分子量只有65Da。使用cut off 4kDa 的濾膜即可將*從抗體中去除
抗體說明書樣本
上海谷研生物科技有限公司放價產品信息:
Cary-Blair Transport Medium
哥倫比亞血瓊脂基礎 250 營養非常豐富,用各種細菌的基礎培養基(AFNOR EP IDF標準)
Columbia Blood Agar Base
亮綠乳糖培養基 250 用于飲用天然礦泉水中大腸桿菌的檢驗(GB標準)
Brilliant Green Lactose Medium
腸道菌增菌肉湯(EE肉湯) 250 用于腸道菌的增菌培養(GB、FDA標準)
Enterobacteria Enrichment Broth
TTC營養瓊脂 250 用于細菌總數測定
TTC Nutrient Agar
LB肉湯 250 用于細菌培養
LB Broth
LB營養瓊脂 250 用于細菌培養
LB Nutrient Agar
苯脫氨酶培養基 00 用于苯脫氨酶試驗
Phenylalanine Deaminase Medium
哥倫比亞MUG培養基 250 用于大腸桿菌的熒光檢測(SN標準)
Columbia- MUG Medium
226E瓊脂 250 用于海生細菌的培養和計數
226E Agar
腸球菌瓊脂(膽鹽-七葉苷-疊氮鈉瓊脂) 250 用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養(Acumedia方法)
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