磺胺甲氧嘧啶和*殘留檢驗的氣相色譜測定方法

（1）試劑和材料
①乙腈：分析純，重蒸餾，收集81—82℃餾分。
②正己烷：分析純，重蒸餾，收集67—69℃餾分。
③乙酸乙酯：分析純，重蒸餾，收集76～陽℃餾分
④丙酮：分析純。
⑤乙醚：分析純，重蒸餾。收集33～34℃餾分，
⑥磷酸二氫鉀溶液：1mo1／l，
⑦*：分析純，經650℃灼燒4L。置于密封容器內備用。
⑧氯化鈉：優級純。
⑨重氮甲烷—乙醚溶液：將裝有氫氧化鉀水溶液（6g／10ml、35ml乙醇（分析純）及10m1乙醚的混合液的燒瓶置于70℃水浴上，邊用磁力攪拌器攪拌邊通過漏斗滴下N—甲基—N—亞硝基—對甲苯磺酰胺（分析純）的乙醚溶液（21.5g／140m1），進行蒸餾。接收器為置于冰浴中的兩個100m1燒瓶。于第2個燒瓶中加入乙醚10m1，以捕集從第1個燒瓶中逸出的氣體重氮甲烷于乙醚中。蒸餾結束后將蒸餾液合并，在70℃水浴上再重新蒸餾1次，蒸餾液即為重氮甲烷—乙醚溶液。此液密閉置于冰箱中，可保持1個月穩定。
注意：重氮甲烷有毒，可引起特異性過敏，而且易引起爆炸，配制重氮甲烷試劑、甲酯化或蒸發應在
通風櫥中進行。重氮甲烷溶液應貯于冷凍器內，不要暴露于直射陽光或強烈的人工光下。
⑩磺胺甲氧嘧啶標準晶：純度≥99％。
⑩*標準品；純度≥99％。
⑩標準溶液：o．1mg／ml。分別準確稱取10．0mg的磺胺甲氧嘧啶和磺胺喹嗯啉標準品，用約10m1乙腈溶解并用乙腈準確定容至100mi，搖勻，為標準貯備液。根據需要再配制成適用濃度的混合標準工作溶液。
（2）測定步驟
①提取 取經絞碎混勻的試樣約10g（到o．01g）于100mI具塞錐形瓶中，加入20m1乙腈，于振蕩器上提取30rain。用中速定量濾紙將乙腈提取液過濾于250ml蒸發瓶中，并用30ml乙腈分3次洗滌殘渣。然后在35~C水浴中用旋轉蒸發器濃縮至近干，加入3ml鹽酸溶液（6mol／L）浸出。
②凈化 于上述鹽酸溶液中加入20mi乙醚—正己烷（1十1）混合液，振搖lmin，靜置10min。用抽吸管將上層有機層緩慢抽出并棄去之。再如上重復凈化兩次。用兩份5m1磷酸二氫鉀溶液（1mol／L）將酸相轉移至125m1分液漏斗中，用氫氧化鈉溶液（6m01／L）調節pH值至8．o～8．5。加入10g氯化鈉，用20ml乙酸乙酯振搖提取3次。合并乙酸乙酯提取液，經*脫水后，收集于100ml蒸發瓶中，然后在35℃水浴中用旋轉蒸發器蒸發
③甲酯化 加入lml丙酮以溶解殘渣，再加入2ml重氮甲烷—乙醚溶液。加塞，室溫下避光放置30min，其間進行斷續輕搖。反應結束后，減壓濃縮至干。準確加人1．00ml乙酸乙酯—正己烷混合液（3+7）以溶解殘渣，溶液供測定。
④標準品甲酯化 取適量磺胺標準工作溶液于具塞試管中，用氮氣吹去溶劑，lml丙酮以溶解殘渣，加入2ml重氮甲烷—乙醚溶液。加塞，室溫下避光放置30min，進行斷續輕搖。反應結束后再用氮氣吹干,準確加入L 00ml乙酸乙酯—正己烷混合液（3+7）以溶解殘渣，溶液供測定。
⑤測定
a．色譜條件
色譜柱：30mX0．53mm（內徑）X1，0um膜厚 熔融石英毛細管柱
色譜柱溫度：245C（8min）—280C1 30min）
進樣口溫度：280C
檢測器溫度：300C
載氣、尾吹氣：氮氣，純度≥99．99％柱流量7ml／iTllB；尾吹氣流量50ml／min
進樣方式：柱頭進樣，五分流
b．色譜測定 分別準確注入斗L經甲酯化后的標準工作溶液及適用濃度的樣品溶液于氣相色譜儀中，按上述色譜條件進行色譜分析。響應值均應在儀器檢測的線性范圍之內?；前芳籽踵奏ぜ柞サ谋Ａ魰r間約為13min，磺胺喹噫啉甲酯的保留時間約為26m[n。
⑥空白試驗 除不加試樣外，按上述測定步驟進行。
（3）靈敏度和回收率
本方法的測定低限：磺胺甲氧嘧啶為5ug／ks，磺胺喹嗯啉為10ug／kg。
磺胺甲氧嘧啶添加濃度在0．005～0．050mg／kz范圍內，回收率為75％一98％；*添加濃度在o．010～0．100mg兒s范圍內，回收率為79％～105％。