小鼠胚胎成纖維細胞培養方法

上海勁馬實驗設備有限公司

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細胞英文名稱   MEF  細胞中文名   小鼠胚胎成纖維細胞
形態特性       成纖維細胞樣　  生長特性    貼壁生長　
特征特性     取孕9天的615小鼠胚胎，去除腦、心臟等培養建立。該細胞可用作飼養層細胞，支持胚胎干細胞ES的生長并維持ES未分化的狀態。當作為飼養層細胞時，MEF需經絲裂霉素C處理停止生長。建議作為ES細胞的飼養層時，MEF不要超過6代。
培養基   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium （DME H-21 4.5g/Liter Glucose） 
血清   10%CS　  其它因子   無

傳代方法
細胞*匯合時，倒掉舊液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶，加培養基混勻分瓶，T25瓶中加培養基至6-8ml，T75瓶加培養基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培養。   P1
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS　  支原體檢測   陰性　
同工酶   　  染色體   　
使用權限   A類  實物狀態   可用