游離脂肪酸含量(FFA)測試盒_分光光度法
測定方法:分光光度法
產品規格:50管/48樣
注 意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
游離脂肪酸,也稱為非酯化脂肪酸,在與白蛋白結合的血漿中循環。動物血液中的游離脂肪酸 (FFA )含量是一項重要的生理生化指標。血清中游離脂肪酸的濃度與脂類代謝、糖代謝、內分泌功能有關,游離脂肪酸的濃度會因為糖尿病、重癥肝障礙、甲狀腺功能亢進等疾病而上升。
游離脂肪酸含量(FFA)測試盒_分光光度法
測定原理:
用有機溶劑萃取FFA。含有FFA的有機液與三乙醇胺銅反應,在有機相中形成脂肪酸銅 (銅皂) FFA一Cu。Cu離子與顯色液反應形成紫紅色絡合物。反應形成的顏色深淺與Cu離子濃度的關系符合朗伯一比爾定律,因此可利用此反應進行比色。
自備的儀器和用品:
可見分光光度計、離心機、可調式移液器、玻璃比色皿、蒸餾水。
試劑的組成和配制:
萃取液:液體 60 mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體 8 mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體 8 mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,室溫保存;
試劑四:液體18 mL×1瓶,4℃保存;
樣本前處理:
1.動物組織:按照動物組織質量(g):萃取液mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL萃取液),進行冰浴勻漿。震蕩提取15min,5000 rpm 4℃離心5min,取有機相待測。
2.血清:吸取50 μL血清樣本,加入1 mL萃取液,震蕩提取15 min后,4℃,5000 rpm離心5 min,取有機相待測。
3.微生物、細胞:按照細胞數量(104個):萃取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1 mL萃取液)加入萃取液,冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲2秒,間隔3秒,總時間3min);震蕩提取15 min,然后5000 rpm 4℃離心5min,取有機相待測。
注意:有機相待測液可能存在于上層,也可能存在于下層,注意觀察,體積較多的那一層即為有機相待測液。