宿主菌Host Strain	基因型Genotype
BL21 strain	E. coli B F-ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm
BL21 (DE3) strain	E. coli B F-ompThsdSB(rB-mB-)galdcm(DE3)
BL21 (DE3) pLysS strain	E. coli B F-ompThsdSB(rB-mB-)galdcm(DE3) pLysS (CamR)

基因型說明：

a）以上三個宿主菌都是大腸桿菌E. Coli. B/r菌株，不含lon蛋白酶，也缺乏外膜蛋白酶OmpT。這兩個關鍵蛋白酶的缺乏降低菌株內表達外源蛋白的降解率。

b）DE3命名表明該菌株染色體上整合λ噬菌體DE3溶原體（DE3 lysogen）（其上攜帶lacUV5啟動子調控的T7 RNA聚合酶基因），IPTG能誘導T7 RNA聚合酶的表達。

c）pLysS命名表明該菌株攜帶pLysS質粒，含有表達T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶能夠作用于大腸桿菌細胞壁上的肽聚糖溶解大腸桿菌，從而能夠降低目的基因的背景表達水平，但不干擾IPTG誘導的表達。pLysS質粒賦予菌株氯霉素抗性（CamR），而且含有p1復制起始子，這一起始子使該菌株兼容于含ColE1或pMB1復制起始子的質粒（比如pUC或pBR322來源的質粒）。

二、BL21/BL21（DE3）/BL21 (DE3) pLysS菌株的應用特征

BL21/BL21（DE3）/BL21 (DE3) pLysS三種宿主菌內T7啟動子表達載體（比如pCAL, pET載體）呈現不同的蛋白表達水平。BL21（DE3）感受態細胞是型菌株，滿足高水平蛋白表達且容易誘導。BL21 (DE3) pLysS感受態更嚴格控制毒性蛋白表達且具氯霉素抗性。

表達宿主	誘導方法	優點	缺點
BL21	λ噬菌體CE6感染	zui嚴格控制背景表達（非誘導表達）	誘導不如DE3衍生菌有效；誘導（感染）過程更冗長
BL21 (DE3)	IPTG誘導lacUV5啟動子驅動的T7聚合酶	高水平表達	T7聚合酶泄露表達，引起潛在毒性蛋白的背景表達（非誘導表達）
BL21 (DE3) pLysS	IPTG誘導的T7聚合酶	容易誘導	與BL21 (DE3)相比，稍微抑制誘導表達

三、BL21/BL21（DE3）/BL21 (DE3) pLysS菌株的異源蛋白表達特征

表達宿主	異源蛋白（Heterologous protein）表達特征
BL21 strain	非毒性蛋白的高水平表達，不能用于T7啟動子驅動的蛋白表達（如pET）
BL21 (DE3) strain	非毒性蛋白的高水平表達，用于T7啟動子驅動的蛋白表達（如pET）
BL21 (DE3) pLysS strain	非毒性和毒性蛋白的高水平表達，背景表達低于BL21 (DE3)，BL21

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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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BL21系列感受態細胞常見問題（懋康生物整理）

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